| 研究概要 |
本研究では,胎盤のトロフォブラスト細胞上に主要組織適合抗原を発現するトランスジェニックマウスを作成し,このこのトランスジェニック胎仔が母親から拒絶を受けるかを検討し,妊娠維持機構における主要組織適合抗原の発現抑制の意義を直接的に解明することを試みた.
胎盤にて発現可能なヒトc-fos遺伝子,あるいはβ-actin遺伝子のregulatory領域と,H-SK^b遺伝子のcording領域から構成される合成遺伝子を用いてマイクロインジェクションを行い,計30匹のファウンダーマウスを得た.ファウンダーマウスのうち計9匹の末梢血有核細胞にH-2K^b抗原の発現を認めた.これらの中の雄マウスをH-2K^b陰性雌マウスと順次交配したが,胎仔の拒絶を示す現象は観察されず,トランス遺伝子陽性と陰性にF_1がほぼ同数出生した.
トランスジェニック胎仔が母胎から拒絶を受けなかったのは,トランス遺伝子がトロフォブラスト細胞では発現されていないことに起因する可能性がある.そこで,経日的に胎盤を胎仔とともに摘出し抗H-2K^b抗体を用い組織染色を行ったが,トランス遺伝子陽性の胎仔に対応する胎盤トロフォブラスト細胞上に,H-2K^b抗原は検出されなかった.さらに,H-2K^b特異的sequenceをprimerとしてin situ primer extension解析を行ったが,H-2K^bmRNAの存在は認められなかった.
ヒト絨毛性性腺刺激ホルモン(hCG)遺伝子は,妊娠初期よりトロフォブラスト細胞が合成分泌する妊娠特異的ホルモンである.上記の合成遺伝子では胎盤にH-2K^bが発現されない可能性を想定し,hCG-β鎖遺伝子5'側のregulatory elementを含む領域とマウスH-2K^b遺伝子のcording領域からなる新たな合成遺伝子を構築した.現在これを用いてトランスジェニックマウスの作成中であり,今後そのファウンダーマウスについて同様のスクリーニングを行なう予定である.
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