胎児仮死予防につながる妊娠ヒト子宮筋細胞内Ca排出機構についての研究

1996 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 06671698
• 研究機関: 福岡大学
• 研究代表者: 瓦林 達比古 福岡大学, 医学部・産婦人科, 助教授 (30142350)
• キーワード: 子宮筋 / 単離細胞 / 細胞内Ca / オキシトシン / ベラパミル / ライアノジン / Fura-2

研究概要

妊娠ラット子宮縦走筋を採取して、細片化後にコラゲナーゼ処理をする事により縦走筋単離細胞を得た。得られた単離細胞にCa感受性蛍光指示薬Fura-2を負荷し、細胞内遊離Ca濃度変化を測定した。妊娠15、18、21日のラット子宮縦走筋細胞に200nMオキシトシンを作用させると、21》18>15日の順に強い収縮が得られた。オキシトシンは濃度依存性に細胞内遊離Caを増やすが、最大値に達するまでの時間は4〜5秒であった。そこで妊娠進行に伴う変化を検討すると、細胞内Ca増加速度も親和性も大きさも21》18>15日の順番になった。次に、オキシトシンによる細胞内遊離Ca増加作用のメカニズムを調べる為に、外液Ca除去、ベラパミル前投与、ライアノジン前投与により各々の差を比較した。その結果、外液Ca除去>ベラパミル前投与>ライアノジン前投与の順にオキシトシンの効果が抑制された。従って、オキシトシンの主な作用点は、表面膜の電位依存性and/or受容器作動性Caチャネルにあるが、一部は細胞内Ca貯蔵部位にもある事が証明された。

研究成果

• [文献書誌] Lin,s-H.,Miyata,S.,Kawarabayashi.T.,Nakashima,T.,Kiyohara,T.: "Hypertrophy of oxytocinergic magnocellular neurons in the hypothalamic supraoptic nucleus from gestation to lactation." Zool.Sci.13. 161-165 (1996)
• [文献書誌] Kaneko,Y.,Kawarabayashi,T.,Ikeda,M.,Sugimori,H.,Tsukamoto,T.: "Characteristics of rat uterus longitudinal muscle B-adrenergic receptors : Changes in Kinetic properties of the receptor during gestation." J.Mol Recog. 9. 233-238 (1996)
• [文献書誌] Kawarabayashi,T.,Kobayashi,M.,Akahane,M.,Ajisawa,Y.: "Comparison of in vitro and in vivo inhibitory effects of peptide and nonpeptide oxytocin antagonists on radioligand binding and uterine contractility of rats during pregnancy." Am.J.Obstet.Gynecol.175. 1348-1355 (1996)
• [文献書誌] Kawarabayashi,T.,Shojo,H.,Tsukamoto,T.: "Effects of oxytocin,prostaglandin F2α and prostaglandin Ee on intracellular free calcium coneentrations of longitudinal muscle cells isolated from term pregnant rat mycmetrium" Gynecol.Obstet.Invest.(in press). (1997)
• [文献書誌] Kawarabayashi,T.,Shojo,H.,Nakamura,S.,Sugimori,H,.Tsukamoto,T.: "Changes in responsiveness of freshly isolated longitudinal muscle cells from rat uterus towards oxytocin during gestation : contractility and calcium signaling" Mol.Cell.Endocrinol.(in press). (1997)
• [文献書誌] Nakao,K.,Inoue,Y.,Okabe,K.,Kawarabayashi,T.,Kitamura,K.: "Various effects of oxytocin on membrane excitability in pregnant human myometrium." Am.J.Obstet.Gynecol.(in press). (1997)