| 研究概要 |
肝細胞増殖因子(以下HGF)は生体の様々な上皮系細胞に対して多彩な効果が報告されている。しかしながら眼科領域、特に角膜の各細胞に対する効果についての報告は少ない。今回、我々HGFの角膜上皮、実質、内皮の各細胞に対する増殖促進効果をEGF、KGFと比較した。また隣接する実質細胞においてHGFが産生されているかどうか検討した。次にin vitroの実験として角膜上皮欠損の創傷治癒過程で実質にHGFが産生されているかどうかを検討した。最後に上皮欠損修復モデルにてHGF点眼が修復に治療的効果が存在するか検討した。
方法としてはin vivoの実験では白色家兎の培養上皮、実質、内皮細胞を使用し、1,5,10ng/mlのHGF、KGF、EGFを添加し、その増殖促進効果を検討した。またヒト培養実質細胞を使用してHGFを産生するかどうかを抗HGF抗体を使用して測定した。次にラットに角膜上皮欠損を作成し、その創傷治癒過程で凍結切片を作成し、抗HGF抗体を使用した免疫組織化学的手法にて実質部のHGFの存在を検討した。最後に白色家兎に上皮欠損を作成し、5,20μg/mlの濃度のHGFを1日4回点眼し上皮修復促進効果を検討した。
HGFは培養家兎上皮細胞に対して増殖促進効果が認められ、その効果はEGFやKGFとほぼ同等であった。ヒト角膜実質細胞は培養下でHGFを再生していた。しかしながらin vivo実験である創傷治癒過程における実質部では今回の方法ではHGFの存在は認められなかった。また家兎の上皮欠損作成後の上皮修復速度をHGF点眼は促進しなかった。
以上の結果よりHGFは角膜の上皮や内皮細胞に対して増殖促進効果が認められ、このHGFは隣接する実質細胞により産生されていることが示唆された。しかしながら今回の染色方法ではin vivoにおいて実質部にHGFの存在は認められず、染色方法の再検討が必要と思われた。一方、HGF点眼が上皮欠損の修復に効果が認められなかったことより、外部からの投与による治療的効果は期待出来ないと考えられる。しかしながら、そのin vivoにおける役割や活性に関しては今後の検討が必要と考えられた。
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