1994 年度実績報告書

細胞間相互作用を介してアポトーシスを制御する接着タンパクの解析

研究課題

研究課題/領域番号	06672168
研究機関	東京大学
研究代表者	内藤幹彦東京大学, 分子細胞生物学研究所, 助手 (00198011)
キーワード	アポトーシス / 接着タンパク
研究概要	マウス悪性Tリンパ腫CS-21細胞は、リンパ節由来ストローマ細胞と共培養すると、in vitroで増殖を続けるが、CS-21細胞を単離して培養するとアポトーシスを起こして死滅する。ストローマ細胞からは、CS-21細胞の増殖に必要な液性増殖因子が供給されているが、CS-21細胞のアポトーシスを回避するためにはCS-21細胞とストローマ細胞との細胞接着が必要であった。そこで、CS-21細胞の生存に必要な細胞接着因子を解析するために、CS-21細胞の、ストローマ細胞への接着を阻害するモノクローナル抗体、MCS-5、19を作成した。MCS-5はCS-21細胞膜上の168kDaタンパクを認識し、単離培養したCS-21細胞のアポトーシスを抑制する活性を示す。CS-21細胞の膜タンパクをTX-100で可溶化し、MCS-5抗体アフィニティーカラム、及びMonoQイオン交換カラムで168kDaタンパクを電気泳動上単一バンドにまで精製した。精製タンパクを臭化シアンで分解し、生じたペプチド断片のアミノ酸配列を解析した結果、168kDaタンパクは、CD45と同一であることが明らかになった。CD45には、スプライシングの違いにより数種類のアイソフォームが存在する。CS-21細胞に発現しているCD45アイソフォームを明らかにするために、CS-21細胞に発現しているCD45のcDNAクローニングを行なった。その結果、得られた18クローンのCD45cDNAのうち16クローンはエクソン4、5、6を欠失したCD45ROアイソフォームであり、残りの2クローンはエクソン4、5、6、7を欠失したアイソフォームであることが明らかになった。これらの結果から、CS-21細胞に発現しているCD45はストローマ細胞との細胞接着に関与するだけでなく、CS-21細胞の生存、アポトーシスの回避にも重要な機能を担っていることが明らかになった。

研究成果
(6件)

すべてその他

すべて文献書誌 (6件)

[文献書誌] Shiro Kataoka: "Resistance to antitumor agent-induced apopatosis in an mutant of human myeloid leukemia U937 cells." Exp.Cell Res.215. 199-205 (1994)
[文献書誌] Tohru Tatsuta: "Enhanced expression by the brain matrix of P-glycoprotein in brain capillary endothelial cells." Cell Growth & Differ.5. 1145-1152 (1994)
[文献書誌] Jeong-Hyung Lee: "Nonenzymatic reductive activation of 7-N-{{2-{[2-(r-L-glutamylamino)ethyl]dithio}ethyl}}mitomycin C by thiol molecules:a novel mitomycin C derivative effective on mitomycin C-resistant tumor cells" Cancer Res.54. 2398-2403 (1994)
[文献書誌] Akio Shirai: "Transport of cyclosporin A across the brain capillary endothelial cell monolayer by P-glyco-protein." Biochim.Biophys.Acta. 1222. 400-404 (1994)
[文献書誌] Seiji Yano: "Cyclosporin A enhances susceptibility of multi-drug resistant human cancer cells to anti-P-glycoprotein antibody-dependent cytotoxicity of monocytes,but not of lymphocytes." Jpn.J.Cancer Res.,. 85. 194-203 (1994)
[文献書誌] Junichi Kobayashi: "Taxuspines A-C,new taxoids from Japanese Yew Taxus Cuspidata inhibiting drug transport activity of P-glycoprotein in multidrug-resistant cells." Tetrahedron. 50. 7401-7416 (1994)

1994 年度 実績報告書

細胞間相互作用を介してアポトーシスを制御する接着タンパクの解析

研究代表者

内藤 幹彦 東京大学, 分子細胞生物学研究所, 助手 (00198011)

研究成果

[文献書誌] Shiro Kataoka: "Resistance to antitumor agent-induced apopatosis in an mutant of human myeloid leukemia U937 cells." Exp.Cell Res.215. 199-205 (1994)

[文献書誌] Tohru Tatsuta: "Enhanced expression by the brain matrix of P-glycoprotein in brain capillary endothelial cells." Cell Growth & Differ.5. 1145-1152 (1994)

[文献書誌] Jeong-Hyung Lee: "Nonenzymatic reductive activation of 7-N-{{2-{[2-(r-L-glutamylamino)ethyl]dithio}ethyl}}mitomycin C by thiol molecules:a novel mitomycin C derivative effective on mitomycin C-resistant tumor cells" Cancer Res.54. 2398-2403 (1994)

[文献書誌] Akio Shirai: "Transport of cyclosporin A across the brain capillary endothelial cell monolayer by P-glyco-protein." Biochim.Biophys.Acta. 1222. 400-404 (1994)

[文献書誌] Seiji Yano: "Cyclosporin A enhances susceptibility of multi-drug resistant human cancer cells to anti-P-glycoprotein antibody-dependent cytotoxicity of monocytes,but not of lymphocytes." Jpn.J.Cancer Res.,. 85. 194-203 (1994)

[文献書誌] Junichi Kobayashi: "Taxuspines A-C,new taxoids from Japanese Yew Taxus Cuspidata inhibiting drug transport activity of P-glycoprotein in multidrug-resistant cells." Tetrahedron. 50. 7401-7416 (1994)

1994 年度実績報告書

内藤幹彦東京大学, 分子細胞生物学研究所, 助手 (00198011)