インターロイキン1のシグナル伝達機構の解析

1994 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 06672194
• 研究機関: 名古屋市立大学
• 研究代表者: 小野嵜 菊夫 名古屋市立大学, 薬学部, 教授 (20101313)
• 研究分担者: 瀧井 猛将 名古屋市立大学, 薬学部, 助手 (80244573) ; 林 秀敏 名古屋市立大学, 薬学部, 講師 (80198853)
• キーワード: インターロイキン1 / レセプター / シグナル伝達 / サイトカイン

研究概要

IL-1レセプター(IL-1R)発現量が極めて少ないために,IL-1に抵抗性になっているヒト、メラノーマ細胞株(A375-5)にヒトI型IR-1R(TypeI)cDNAをトランスフェクトさせ、IL-1に感受性を獲得させたクローンを用い、IL-1の増殖阻害に至るシグナル伝達系を解析した。結果(1)、IL-1Rに対する抗体を用いたFACSにより高発現クローンを得、サブクRーンを得た。(2)このようにして得たサブクローンはIL-1RのmRNA発現量が、A375-5に比べて多かった。(3)、アイソトープラベルしたIL-1の結合実験から、トランスフェクタントは、多量のIL-1Rを細胞表面に発現していた。(4)、サブクローンは1L-1に対する感受性を獲得していた。(5)、IL-1に高感受性株を用い、IL-1で処理すると、経時的かつIL-1の量依存的にオルニチンデカルボキシラ-ザ(ODC)の活性が減少していた。(6)、また、活性と比例してODCの蛋白量の減少が認められた。(7)サブクローンのうちのいくつかは、IL-6も同時に産生していたが、IL-6の産生量とIL-1に対する感受性の間には相関が無かった。
ヒト、線維芽細胞株を用い、IL-1RmRNAの安定性の機構について検討した。その結果、Tyrosine Kinaseの阻害剤、Herbimvcin.Genestatinで処理すると、HerbimycinはIL-1R mRNAを不安低下したが、Genestatinにはそのような活性が見られなかった。従って、Tyrのリン酸化よりも、むしろ細胞内の酸化還元状態が重要と思われる。
マウスにエンドトキシンやIL-1を投与して、各臓器におけるIL-1R(TypeI)mRNAの発現量を調べた。その結果、肝臓において著しい増加が認められた。

研究成果

• [文献書誌] T.Takii,H.Hayashi,T.Marunouchi,K.Onozaki: "Interleukin1 down-regulates type I interleukin1 receptor mRNA expression in a human fibioblast cell line in the absence of PGEz syntheasis." LYMPHOKINE AND CYTOKINE RESEARCH. 13. 213-219 (1994)
• [文献書誌] Y.Takii,K.Wada,T.Chiba,H.Hayashi,T.Ishihara,K.Onzaki: "Development of glycosylated human IL-1α,neoglyco IL-1α,coupled caith D-mannose demier;Synthesis and biologcal activities in vitro." LYMPHOKINE AND CYTOKINE RESEARCH. 13. 265-270 (1994)
• [文献書誌] K.Wada,T.Chiba,Y.Takei,H.Ishihara,H.Hayashi,K.Onzaki: "Synthes is of immunosuppressive neoglycoproteins:Bovine serum albumin coupled with 8(hydrazino-carbnoyl)octyl4-or6-0-α-D.Man-α-D-Man." Journal of CARBOHYDRATE CHEMISTRY. 13. 941-965 (1994)
• [文献書誌] T.Miyamoto,A.Takeuchi,H.Hayashi,K.Onozaki: "Novel growth promoting activity with a wide target cell spectrum is preseut in extracto of various cell types." Biochemistry and Moleular Biology International. 32. 973-981 (1994)
• [文献書誌] A.Takeuchi,T.Miyamoto,H.Hayashi,M.Tomita,K.Onozaki: "Purification and characterigation of a human ergthrocyte-derived growth factor coith a wide target cell spectrum." The Journal of Biological Chemistry. 269. 24935-24940 (1994)