| 研究課題/領域番号 |
06672208
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| 研究機関 | 北陸大学 |
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研究代表者 |
山本 郁男 北陸大学, 薬学部, 教授 (50069746)
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| 研究分担者 |
宇佐見 則行 北陸大学, 薬学部, 助手 (60257483)
松永 民秀 北陸大学, 薬学部, 講師 (40209581)
渡辺 和人 北陸大学, 薬学部, 助教授 (30113038)
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| キーワード | アルコーナ / アルデヒド / オキシゲナーゼ / カンナビノイド / クローニング / MALCO / MALDO / P450 |
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| 研究概要 |
新規カルボニル基代謝酵素Microsmal Aladehyde Oxygenase(MALDO)及びMicrosomal Alcohol Oxygenase(MALCO)の構造と機能解析に関する研究に関して、平成6年度は以下の点を解明した。
1)各週令のddN系雄マウス肝ミクロソーム中のシトクロムP450 MUT-2(CYP2C29)の量をウエスタンブロッティング法により測定し、その含量と9-アントラアルデヒド及び11-oxo-△^8-tetrahydrocannabinolを基質としたMALDO活性との間に良い相関が見られた。また、マウスをフェノ-バルビタール100mg/kg 2日間前処理することによりCYP2C29のmRNA量が2倍増加することが明らかとなった。これはウエスタンブロッティングにより測定したミクロソーム中のCYP2C29の含量に良く対応する結果であった。
2)9-アントラアルヒドのMALDO活性を指標にデキサメタゾン処理ddN系雄マウス肝ミクロソームよりP450 MDX-A、雌モルモット肝ミクロソームよりP450 GPF-A、サル肝ミクロソームよりP450 JM-Cを各々精製した。これらP450はN末端アミノ酸配列の分析結果より、いずれもCYP2Bサブファミリーに属する分子種であることを明らかにした。
3)7-Hydroxy-△^8-tetrahydrocannabinolを基質としたMALCO活性を指標に、ddN系雄マウス肝ミクロソームよりP450 MDX-B、雌モルモット肝ミクロソームよりP450 GPF-B及び雌ニホンザル肝ミクロソームよりP450 JM-Eを精製した。これらP450はN末端アミノ酸配列の分析結果より、いずれもCYP3Aに属する分子種であった。
4)これらの結果り、9-アントラアルヒドのMALDO活性にはCYP2B分子種が、7-Hydroxy-△^8-tetrahydrocannabinolのMALCO活性にはCYP2A分子種が各々関与することが明らかとなった。また、CYP3Aに属すると考えられる分子種はいずれも高いテストステロン6β水酸化活性を有することも示された。
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