| 研究課題/領域番号 |
06672298
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| 研究機関 | 福島県立医科大学 |
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研究代表者 |
大戸 斉 福島県立医科大学, 医学部, 助教授 (20150279)
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| 研究分担者 |
氏家 二郎 福島県立医科大学, 医学部, 助手 (10168685)
遠藤 力 福島県立医科大学, 医学部, 講師 (50168829)
大久保 光夫 福島県立医科大学, 医学部, 助手 (40260781)
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| キーワード | 血小板抗体 / 妊婦 / DNA診断 / 遺伝子増幅 / 血小板型 / 出生前診断 |
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| 研究概要 |
1.妊婦の血小板抗体スクリーニング結果
延べ10000名の妊婦の抗血小板抗体をMPHA(血小板固相赤血球凝集法)を用いてスクリーニングし、96名の抗体陽性者を検出した。
その内訳はHPA-4b:24名、5a:2名、5b:68名、4b+5b:1名、NaK^a:1名である。
2.高力価血小板抗体保有妊婦の羊水による胎児血小板型DNA診断
高力価(64〜1280倍)抗HPA-4b血小板抗体を保有する3名の妊婦から羊水を採取し、胎児由来の細胞を得てPCR-SSP法を用いて児の血小板型を推定した。2名は母体の抗体と適合(HPA-4a/a)で後の1名は不適合(HPA-4a/b)と出生前診断した。はたして、2名の新生児の血小板数は正常で、1名は血小板減少であった。血小板型も出生前に推定した通りであった。下記プライマーを組み合わせたPCR-SSP法が実用にも適していることが実証された。
3.HPA-4,および-5のDNA診断における遺伝子増幅用プライマーの設定
今まで、PCR-SSP法においてHPA-4型の診断には難があった。またHPA-5の診断は不可能であったが、エクソン部にイントロンを組み合わせたプライマーを設定したことにより安定して決定できた。
HPA-4(a+b-) 5'-GCT GGC CAC CCA GAT GCG-3'
HPA-4(a-b+) 5'-GCT GGC CAC CCA GAT GCA-3'
HPA-4 common 5'-TAG CAG GGG TTT TCG AGG GCC TCT-3'
HPA-5(a+b-) 5'-TAC CTG TTT ACT ATC AAA G-3'
HPA-5(a-b+) 5'-TAC CTG TTT ACT ATC AAA A-3'
HPA-5 common 5'-CTC TCA TGG AAA ATG GCA G-3'
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