| 研究概要 |
最近われわれと別のグループが発見し,解析を進めているアダプター蛋白質Grb2/Ashは,細胞外から受容体に伝わったシグナルをGTP結合蛋白質に伝えるという,シグナル伝達系の鍵となる連結分子のひとつであることが分かってきた.その機能をさらに明らかにするため,われわれは,Ashに対する抗体を細胞に微量注入する実験を進め,以前われわれが明らかにしたAshの細胞膜ラフリングへの関与がインスリン刺激に際しても存在することを示した.また,GST融合蛋白質や免疫沈降法を用いてAshと他の蛋白質との相互作用を調べたところ,Ashの下流側では,Ras蛋白質に対するグアニンヌクレオチド交換因子であるSosのほかに,新規分子C3Gが発見され,またミクロチュブール結合性GTPaseであるダイナミンがAshに結合することが見出され,AshとGTP結合蛋白質あるいはそれらの調節分子との相互作用のますます多様であることが明らかになった.一方,上流側では,Ashは神経成長因子の作用発現に関与しているにも関わらず,刺激を受けてチロシン残基がリン酸化されたその受容体Trkには直接結合しないことが分かり,Ash/Grb2を介したシグナル伝達系がさらに複雑であることが示された.このように,Grb2/Ashを巻き込んだ分子間相互作用の解析は充分に進展し,その生理的役割について重要な知見が得られたと思われる.われわれはさらに進めて,2種類のDNAをベクターに組み込み,コードするペプチドを発現し,その2分子間の相互作用を検出するというシステムを活用することによってcDNA発現ライブラリをスクリーニングし,Ashに結合する未同定の蛋白質を包括的に検索するという計画を進めているが,これまで知られていなかったAshに結合する思われる分子がいくつか得られたので,それらのcDNAクローンについて解析を進めている.
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