細胞のがん化に関与する新規転写制御因子の解析

1994 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 06780570
• 研究機関: 千葉県がんセンター
• 研究代表者: 尾崎 俊文 千葉県がんセンター, 研究局・生化学研究部, 研究員 (40260252)
• キーワード: 差し引きスクリーニング / 細胞周期

研究概要

ラット繊維芽細胞3Y1とRSVにより形質転換された3Y1細胞間での、差し引きスクリーニング法によってクローン化されたラットN17遺伝子の発現は、後者において上昇しており、また、3Y1細胞のG1後期にmRNAの蓄積が認められ始めるが、S期開始とともにmRNA量の顕著な減少が観察されることから、この遺伝子産物の細胞周期調節機構への関与が示唆されていた。一方、構造解析から、N17遺伝子産物はbZIP構造を持つ新規の転写因子として機能する可能性が考えられたが、具体的な証明はなされていない。本研究では、N17遺伝子産物の生物学的な機能を調べるために、この遺伝子を3Y1細胞に導入し強制発現させることを試みた。ネオマイシン耐性を指標にスクリーニングを行なった結果、得られた16耐性株中、3株ではN17遺伝子の発現が顕著に増加していた。現在、これらの高発現株の性質を検討している。最近、出芽酵母のcdc37遺伝子に対応するハエの遺伝子(Dmccdc37)がクローン化された。驚くべきことに、N17遺伝子産物はDmcdc37とアミノ酸配列レベルで、全体で47%、N末端側(1-40)では85%の相同性を示すことが判明した。従って、N17遺伝子が、現在までに報告されていない哺乳類のcdc37遺伝子である可能性は極めて高いと思われる。興味深いことに、酵母のCDC37突然変異はG1/S停止を誘導かることが知られているが、N17遺伝子の発現レベルがG1/S境界域で変動する事実は、両者の機能的相関を示唆すると考えられる。現在、N17遺伝子産物が酵母のCDC37突然変異を相補出来るか否かの検討を行なっている。

研究成果

• [文献書誌] Ozaki,T.: "Overexpression of DAN gene product in normal rat fibroblasts causes a retardation of the entry into the sphase." Cancer Research. 55. 895-900 (1995)
• [文献書誌] Enomoto,H.: "Identification of human DAN gene,mapping to the putative neuroblastoma tumor suppressor locus." Oncogene. 9. 2785-2791 (1994)
• [文献書誌] Ozaki,T.: "Complex formation between lamin A and the retinoblastoma gene product:Identification of the domain on lamin A required for its interaction." Oncogene. 9. 2649-2653 (1994)
• [文献書誌] Sakiyama,S.: "Molecular cloning and characterization of a cDNA showing tumor suppressive activity in v-src-transformed 3Y1 rat fibroblasts." Advan.Enzyme Requl.34. 247-255 (1994)
• [文献書誌] Ozaki,T.: "Tumor-suppressive activity of NO3 gene product in v-src-transformed rat 3Y1 fibroblasts." Cancer Research. 54. 646-648 (1994)