| 研究概要 |
本研究は、ブタ卵の体外成熟・体外受精およびPCR法をはじめとした手法を駆使し、ブタ卵の成熟、受精および発生過程におけるサイトカイン遺伝子およびそのレセプター(R)遺伝子の発現とその機能を明らかにすることを目的としたものである。
本研究の結果から、1)上皮成長因子(epideremal growth factor;EGF)、塩基性線維芽細胞成長因子(basic fibrobast growth factor;bFGF)、I型インシュリン様成長因子(insuin-like growth factor I;IGF-I)および血小板由来成長因子A鎖(Plateletderived growth factor A;PDGF-A)遺伝子発現は成熟から2細胞期までの各段階を通じて観察されたが,8〜16細胞期以後に検出されず、これらのGF遺伝子は母性由来であることが解った。一方、アルファ型形質転換成長因子(transforming growth factor-alpha;TGF-α)遺伝子発現は発生過程においてのみ観察され、同遺伝子は胚性由来であることが判明した。2)IGF-I-RおよびPDGF-Rα遺伝子発現は成熟、受精および発生の各段階を通じて観察されるが,EGF-RおよびbFGF-R-遺伝子発現は受精過程で観察されなかった。3)GF-Rチロシンキナーゼ阻害剤であるゲニステインあるいはハービマイシンA添加により,卵丘細胞膨潤化および核成熟が有意に低下し,GFがブタCOCの卵丘細胞層膨潤化および卵母細胞の核成熟の進行に大変重要であることが解った。4)体外成熟期間を36時間から42時間に延長することにより、ブタ体外成熟・体外受精卵の胚盤胞への発生率が著しく増加し、成熟過程における卵母細胞内での遺伝子発現に伴う生理活性物質蓄積が受精後の胚盤胞への発生に重要であることが示唆された。従って、本研究はこれまで全く未解明なブタ卵の成熟・受精・発生過程におけるサイトカインとそのレセプター遺伝子情報の発現状況ならびにその経時的変化を明らかにしたばかりでなく、ブタ卵の体外成熟・体外受精による胚盤胞の効果的作出条件を初めて見出すなどの多くの新知見を見出すことができた。
|
