| 研究概要 |
グルタチオントラスフェラーゼP(GST-P)はラット肝発癌過程の極めて初期から特異的に、強く発現される薬物代謝酵素で広く腫瘍マーカーとして用いられている。本研究はGST-P遺伝子の肝発癌過程特異的な発現機構を解明し発癌過程における遺伝子発現制御機構の変化を解析することを目的としており、本年度は以下の成果が得られた。
GST-P遺伝子の転写制御領域に結合する癌遺伝子産物Mafによる活性化を調べるため、ラットからmaf関連遺伝子のcDNAクローンを2種類(rat maf-1,maf-2)得て、これらのDNA結合性、転写活性化などの性質および発現の分布を調べた。これらは互いによく似ており、すでにトリなどで報告されているmafB、c-mafに相当するものと考えられた。これらの2つの遺伝子産物はGST-P遺伝子を強く活性化する。GST-P遺伝子の転写制御領域に存在する2つのTRE様配列、GPE1、転写開始点の近くに存在するTRE配列の両方に結合し、それぞれを活性化した。しかし、現在までのところラット肝発癌過程の初期からGST-P遺伝子の活性化に伴ってこれらのmaf関連遺伝子が活性化されているという知見は得られていない。このことからGST-P遺伝子の活性化にはこれらとよく似た関連遺伝子が存在するのかまたは未知の因子とヘテロ二量体を作ることによって活性化される可能性などについて検討している。さらに、mafにはDNA結合領域のみを持ち転写活性化領域を持たないSmall mafと呼ばれる関連遺伝子が存在するが、Small mafの1つ、ラットmafKをクローンし、その性質をトランスフェクションで調べたところGST-P遺伝子の制御領域を持つレポーター遺伝子の発現を非常に強く抑制する事がわかった。これらが正常肝でのGST-Pの発現を負に制御している可能性についても検討を加えている。
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