1994 年度実績報告書

肝細胞分泌神経再生促進因子の同定と老化神経活性化の機構

研究課題

研究課題/領域番号	06833011
研究機関	横浜市立大学
研究代表者	堀江秀典横浜市立大学, 医学部, 講師 (80046135)
キーワード	肝細胞 / 老化 / 神経再生促進因子 / コラーゲンゲル / 器官培養 / 成熟・老化ラット・マウス / 末梢神経 / 網膜
研究概要	肝細胞から分泌される因子が老化した末梢神経の神経再生を促進するだけでなく、成熟動物の中枢の神経組織からの神経再生をも促進することを明らかにしてきた。本研究は:(1)肝細胞分泌神経再生促進因子の分離・精製を更に進め、この因子を単離しそのアミノ酸シークエンスを決定すること、(2)この因子の作用機序を明らかにすること。を目的として行ってきた。その結果: 1.神経再生アッセイ系による肝細胞分泌神経再生・生存維持因子の精製法の確立 (1)末梢神経系:成熟・老化マウス及びラットから神経線維を伴った脊髄後根神経節を摘出しコラーゲンゲル内で培養し肝細胞の培養上精の分離分画をアッセイして活性因子の分離精製を進めた。限外濾過膜、ゲル濾過法、各種クロマトグラフィーを用い活性画分の分離精製法を確立し、活性画分の単離に成功した。 (2)中枢神経系:成熟ラットの網膜を培養してアッセイ系として用い、(1)での活性画分の活性を確認した。末梢神経での活性画分に活性を示した。同一の肝細胞分泌神経再生・生存維持因子が末梢神経のみならず中枢神経系に対しても活性を示すことが明らかとなった。 2.肝細胞培養上精の分離精製培養上精500L集め分離精製を行いアミノ酸シークエンスの部分的決定に成功し、この因子が新規である可能性が極めて高くなった。(特許の関係で詳細報告は割愛) 3.肝細胞分泌因子による神経再生促進・生存維持機構の解明活性因子によるアッセイ系の神経組織中での神経栄養因子のmRNAの発現レベルの変化を測定中であり近々その作用機序が明らかになると思われる。

研究成果
(9件)

すべてその他

すべて文献書誌 (9件)

[文献書誌] Horie,H.: "Regional differences in neurite regeneration of postnatal retinal explants." Brain Res.Bull.34. 381-384 (1994)
[文献書誌] Sango,K.: "Diabetes-induced reduction of neuronal survival in hypotonic environments in culture." Brain Res.Bull.34. 365-368 (1994)
[文献書誌] Takano,M.: "Critical period for degradation of adult rat retinal ganglion cells and their regeneration capability after axotomy." Neurosci.Lett.175. 129-132 (1994)
[文献書誌] Sango,K.: "Nerve growth factor (NGF) restores depletions of calcitonin gene-related peptide and substance P in sensory neurons from diabetic mice in vitro." J.Neurol.Sci.126. 1-5 (1994)
[文献書誌] Horie,H.: "Three-demensional cell aggregation enhnces growth-promoting activity of NGF in adult DRG." NeuroReport. 6. 37-41 (1994)
[文献書誌] Horie,H.: "Tissue culture method for neural regeneration of postnatal and mature mammalian retina." Tiss.Cul.Res.Commun.13. 171-178 (1994)
[文献書誌] Zhang,H.: "Isolation and response to mitogens of Schwann cells from adult mouse sciatic nerve." J.Neurosci.Res.(In press). (1995)
[文献書誌] 堀江秀典: "神経組織と3次元培養-成熟動物の神経再生研究への適用-" 組織培養. 20. 257-262 (1994)
[文献書誌] 高野雅彦: "成熟網膜神経節細胞の培養と軸索再生" 神経眼科. 11. 278-285 (1994)

1994 年度 実績報告書

肝細胞分泌神経再生促進因子の同定と老化神経活性化の機構

研究代表者

堀江 秀典 横浜市立大学, 医学部, 講師 (80046135)

研究成果

[文献書誌] Horie,H.: "Regional differences in neurite regeneration of postnatal retinal explants." Brain Res.Bull.34. 381-384 (1994)

[文献書誌] Sango,K.: "Diabetes-induced reduction of neuronal survival in hypotonic environments in culture." Brain Res.Bull.34. 365-368 (1994)

[文献書誌] Takano,M.: "Critical period for degradation of adult rat retinal ganglion cells and their regeneration capability after axotomy." Neurosci.Lett.175. 129-132 (1994)

[文献書誌] Sango,K.: "Nerve growth factor (NGF) restores depletions of calcitonin gene-related peptide and substance P in sensory neurons from diabetic mice in vitro." J.Neurol.Sci.126. 1-5 (1994)

[文献書誌] Horie,H.: "Three-demensional cell aggregation enhnces growth-promoting activity of NGF in adult DRG." NeuroReport. 6. 37-41 (1994)

[文献書誌] Horie,H.: "Tissue culture method for neural regeneration of postnatal and mature mammalian retina." Tiss.Cul.Res.Commun.13. 171-178 (1994)

[文献書誌] Zhang,H.: "Isolation and response to mitogens of Schwann cells from adult mouse sciatic nerve." J.Neurosci.Res.(In press). (1995)

[文献書誌] 堀江秀典: "神経組織と3次元培養-成熟動物の神経再生研究への適用-" 組織培養. 20. 257-262 (1994)

[文献書誌] 高野雅彦: "成熟網膜神経節細胞の培養と軸索再生" 神経眼科. 11. 278-285 (1994)

1994 年度実績報告書

堀江秀典横浜市立大学, 医学部, 講師 (80046135)