Mosがん遺伝子によるMAPキナーゼおよび転写調節因子の活性制御

1995 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 07272238
• 研究機関: 久留米大学
• 研究代表者: 岡崎 賢二 久留米大学, 分子生命科学研究所, 助教授 (50211115)
• キーワード: Mos / Fos / キナーゼ / リン酸化 / がん / 分解 / MAPキナーゼ

研究概要

Mosとc-Fosの共発現における相乗的ながん化能増強の原因を明らかにするため、マウスNIH3T3細胞での一過性発現の系でMosとの共発現時におけるc-Fosについて詳細に解析した結果、Mosのキナーゼ活性に依存して、c-Fosの蓄積量およびリン酸化が著しく増加していること、さらに高度にリン酸化を受けたc-Fosが低リン酸化型のc-Fosに比較して有意に長い半減期を持つことを明らかにしていた。今回、C末を欠失した変異c-Fosの安定性について、Mosによる影響を含めて解析を行なった結果、わずか19個のアミノ酸を欠いた変異体c-FosΔCが野性型c-Fosに比べてはるかに安定であることがわかった。従って、ここで失われた領域中に少なくともひとつc-Fosの寿命を縮めるシグナルが存在していることになる。さらに重要なことは、c-FosΔCがMosを介したリン酸化を受けず、これ以上の安定化を受けないことである。この結果、C末19アミノ酸がMosを介したリン酸化と安定化に必要な領域であることも示された。
次いで、Serからリン酸化を受けないAlaへの変異体を作製することにより、Ser362またはSer374の変異で部分的に、そして、この両方のSerの変異で完全にMosによる安定化が抑制されることが示された。また、^<32>Pの取り込みからこの二つのSerがMosを介したリン酸化の部位であることも確かめられた。さらにこの部位をリン酸化セリンと同じように酸性側鎖をもつAspに替えると、Mosの発現なしにc-Fosが安定になること、そして単独で強いがん化能を示すことが明らかになった。

研究成果

• [文献書誌] Kenji OKAZAKI: "The Mos/MAP kinase pathway stabilizes c-Fos by phosphorylation and augments its transforming activity in NIH3T3 cells." The EMBO Jaurnal. 14. 5048-5059 (1995)
• [文献書誌] Kenji OKAZAKI: "MAP kinase activation is essential for ancogenic transformation of NIH3T3 cells by Mos." Oncogene. 10. 1149-1157 (1995)
• [文献書誌] Chizuko TSURUMI: "Degradation of c-Fos by the 26S proteosome is accelerated by c-Jun and maltiple protein kinases." Molecular and Cellular Biology. 10. 5682-5687 (1995)
• [文献書誌] Kenji OKAZAKI: "Isolation of a cDNA encoding the Xenopus homolog of manmalian Cdc25A that can indace meiotic maturation of oocptes." Gene. in press. in press- (1996)
• [文献書誌] 岡崎賢二: "卵減数分裂の細胞周期を制御するキナーゼMos" 実験医学. 13. 481-483 (1995)
• [文献書誌] 岡崎賢二: "Mos-MAPキナーゼ経路による細胞がん化機構" 細胞工学. 15(in press). (1996)
• [文献書誌] 岡崎賢二: "「免疫実験操作法I,II」 mRNAの調製法 λgt11法とλgt10法" 南江堂, 1236 (1995)
• [文献書誌] 岡崎賢二: "「用語ライブラリー細胞周期」 Mos(動物の細胞周期を制御する基本因子)" 羊土社, 167 (1995)