膜タンパク質DRAP27を介した膜結合型細胞増殖因子と細胞接着因子のクロスリンク

1995 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 07273268
• 研究機関: 久留米大学
• 研究代表者: 目加田 英輔 久留米大学, 分子生命科学研究所, 教授 (20135742)
• 研究分担者: 岩本 亮 久留米大学, 分子生命科学研究所, 助手 (10213323) ; 常岡 誠 久留米大学, 分子生命科学研究所, 講師 (50197745)
• キーワード: DRAP27 / CD9 / 膜結合型細胞増殖因子 / インテグリン / 細胞間接着部位 / HB-EGF / CD63

研究概要

細胞接着を介した増殖の制御や情報伝達は、癌細胞の増殖や転移の機構を明らかにする上できわめて重要な問題である。DRAP27/CD9は、膜結合型細胞増殖因子HB-EGFにアソシエ-トしているばかりでなく、細胞間接着に関与すると考えられているインテグリンα3β1ともアソシエ-トしている分子である。本研究は、DRAP27/CD9が細胞増殖因子や細胞接着因子と如何に関わり、どの様な機能を果たしているのか、HB-EGF、DRAP27/CD9、インテグリン3者の複合体の細胞増殖の制御における役割解明を目指すものである。今年度はこの複合体についてさらに詳しい解析を行ない、次の成果を得た。
サル腎由来のVero細胞における3者の細胞内局在部位の決定を間接蛍光体法によって調べた。その結果、これらは主に細胞間接着部位に分布し、2重染色でその局在は一致した。HB-EGFのリセプターとなるEGFリセプターについても、細胞間の接着部位への集積が見られた。同じ細胞について、カドヘリン、カテニンと比較を行なったが、その局在はかなり一致しており、HB-EGF複合体がアドヘーレンスジャンクション近傍に存在することが示唆された。また、CD9と同じTM4ファミリーに属するCD63がこの複合体にアソシエ-トしていることを明らかにした。
以上の成果より、DRAP27/CD9は、膜結合型細胞増殖因子、細胞接着因子、他のTM4ファミリーのタンパク質を含んだ機能的複合体として細胞間接着部位に存在し、細胞接着を介した細胞間相互作用に働いている可能性が示唆された。今後さらにこの複合体の生理的並びにガン化における役割について検討していきたい。近年同じTM4ファミリーに属するCD82が膀胱がんのがん抑制遺伝子として同定されており、この複合体におけるCD9、CD63についても、そのような観点から調べていきたい。

研究成果

• [文献書誌] Mitamura, T.: "Diphtheria toxin binds to the EGF-like domain of human heparin-binding EGF-like growth factor/diphtheria toxin receptor and inhibits specifically its mitogenic activity." J. Biol. Chem.270. 1015-1019 (1995)
• [文献書誌] Higashiyama, S.: "The membrane protein CD9/DRAP27 potentiates the growth factor activity of the membrane-anchored heparin-binding EGF-like growth facor (HB-EGF)." J. Cell Biol.128. 929-938 (1995)
• [文献書誌] Nakamura, K.: "Membrane anchored heparin-binding EGF-like growth factor and DRAP27/CD9 form a complex with integrin 31 at cell-cell contact sites." J. Cell Biol.129. 1691-1705 (1995)
• [文献書誌] Goishi, K.: "Phorbol ester induces the rapid processing of cell surface heparin-binding EGF-like growth factor; Conversion from juxtacrine to paracrine growth factor activity." Mol. Biol. Cell. 6. 967-980 (1995)
• [文献書誌] Shishido, Y.: "Heparin-like molecules on the cell surface potentiate binding of diphtheria toxin to the diphtheria toxin receptor/membrane-anchored heparin-binding EGF-like growth factor." J. Biol. Chem.270. 29578-29585 (1995)
• [文献書誌] Mekada, E.: "Handbook of natural toxins: Volume 8, Bacterial toxins and virulence factors in disease" Moss, J., Iglewski, B., Vaughan, M. & Tu, A. T. (Marcel Dekker Inc., New York), 15 (1995)