エイズの病態と制御に関する基礎研究 柱5・感染と病態の制御

1995 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 07277103
• 研究機関: 東京医科歯科大学
• 研究代表者: 山本 直樹 東京医科歯科大学, 医学部, 教授 (00094053)
• 研究分担者: 伊藤 正彦 山梨医科大学, 医学部, 教授 (90045740) ; 松下 修三 熊本大学, 医学部, 助手 (00199788) ; 志田 壽利 京都大学, ウイルス研究所, 助教授 (00144395) ; 多比良 和誠 筑波大学, 応用生物化学系, 教授 (10261778) ; 高久 洋 千葉工業大学, 工学部, 教授 (50101267)
• キーワード: HIV / V3loop / リボザイム / Rev / クワシスピーシス / 中和モノクローナル抗体 / 硫酸アルキルオリゴ糖 / エイズ遺伝子治療

研究概要

1.山本)HIVの細胞進入とウイルス増殖に必要な細胞側因子を同定するためにenv蛋白のV3loopと修飾遺伝産物に結合する分子をYeast two hybridで検索し、いくつかの新しい遺伝子を得た。
2.高久)三重鎖を形成することのできるユニークなDNAオリゴマーを見いだした。さらに、このDNAオリゴマーのin vitro系での三重鎖形成能と抗HIV活性を評価すること、および、詳細な作用機序の解明を試みた。
3.多比良)これまでに複数のリボザイム(RZ)を同時に発現させることにより、耐性株の出現を効果的に抑制きるようにした多弾型RZ発現系を開発した。さらに、デコイ機能を付加し、より高い抗HIV効果がみれるどうか調べている。
4.志田)薬剤耐性ウイルスの出現の問題を克服する一つの方法は宿主因子を標的とする薬剤の開発である。エイズ薬開発の基礎としてRevの宿主コファクター、阻害因子の同定と解析を行い、新しい細胞の制御因子考えられるCellular revのCloningを進めている。
5.松下)約半数の症例でHIVクワシスピーシスの増殖が中和モノクローナル抗体と逆転写酵素阻害剤ddIの用により抑制できることを示した。さらに、中和モノクローナル抗体の臨床試験にむけての基礎研究を行いCD4関連分子を用いて、さらに多くの症例でのクワシスピーシスの増殖の抑制を試みた。
6.伊藤)経静脈的に投与した時に高い血中濃度を持続する硫酸アルキルオリゴ糖(DL-110)を発見し、これを告した。さらに、経口投与可能な誘導体(BSL)を合成したので、、その作用機序と臨床有用性について検討中でる。
7.島田)リンパ球あるいは造血幹細胞への遺伝子導入法を開発し、これを使った新しいエイズ遺伝子治療法ストラテジーを確立するための条件検討を行った。また、CD4陽性細胞に特異的に感染できるHIVベクター開発した。

研究成果

• [文献書誌] J.Suzuki,et al.: "The association of antibodies against HTLV-1pX-gene mutant products with HTLV-1-associated myelopathy(HAM)/tropical spastic paraparesis(TSP)." J.Infect.Dis.(in press).
• [文献書誌] N.Yamamoto: "The role of cytokines in the acquired immunodeficiency syndrome." Int J Clin Lab Res. 25. 29-34 (1995)
• [文献書誌] T.Hatta,et al.: "Phosphorothioate oligonucleotides block reverse transcription by the RNase H activity associated with the HIV-1 polymerase." Biochem.Biophys.Res.Commun.211. 1041-1046 (1995)
• [文献書誌] K.Hosono,et al.: "Properties of base-pairing in the stem region of hairpin antisense oligonucleotides containing 2'-methoxynucleosides." Biochem.Biophys.Acta. 1244. 339-344 (1995)
• [文献書誌] T.Shimayama,et al.: "Generality of the NUX rule;Kinetic analysis of the results of systematic mutations in the trinucleotide at the cleavage site of hammerhead ribozymes." Biochemistry. 34. 3649-3654 (1995)
• [文献書誌] S.Sawata,et al.: "Kinetic evidence based on solvent isotope effects for the nonexistence of a proton-transfer process in reactions catalyzed by a hammeread ribozyme:Implication to the double-metal-ion mechanism of catalysis." J.Am.Chem.Soc.117. 2357-2358 (1995)
• [文献書誌] Y.Tanaka,et al.: "Induction of antibody responses that neutralize human T-cell leukemia virus type I infection in vitro in vitro and in vivo by peptide immunization." J.Virol.68. 6323-6331 (1994)
• [文献書誌] J.Katahira,et al.: "Effect of translation initiation factor elF-5A on the functioning of human T-cell leukemia virus type I Rex and human immunode ficiency virus Rev inhibited trans dominantly by a Rex mutant deficient in RNA binding." J.Virol.69. 3125-3133 (1995)
• [文献書誌] S.Matsushita,et al.: "Neutralizing monoclonal antobodies against human immunodeficirncy virus type 2gp120." J.Virol.69. 3333-3340 (1995)
• [文献書誌] S.Matsumi,et al.: "Neutralizing monoclonal antibody against an external envelope glycoprotein(gp110)of SIVmac251." AIDS Res.Hum.Retrov.6. 501-508 (1995)
• [文献書誌] H.Shang,et al.: "Suppression of HIV-1 reverse transcriptase activity by culture supernatants of mycoplasmas." Microbiology and Immunology. (in press).
• [文献書誌] H.Nakashima,et al.: "Sulfated alkyl oligosaccharides inhibit human immunodeficiency virus in vitro and provide sustained drug levels in mammals." Antiviral Chemistry & Chemotherapy. 6. 271-280 (1995)
• [文献書誌] T.Shimada,et al.: "Targeted gene transfer into CD4 positive cells by HIV based retrovital vectors." J.Acta Hematologica. (in press).
• [文献書誌] K.Tamayose,et al.: "A new strategy for large scale preparation of high titer recombinant adeno-associated virus(AAV)vectors by using packaging cell lines and sulfonated column." Hum.Gene Thera.(in press).