受粉・受精機構の解析

1995 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 07281103
• 研究種目: 重点領域研究
• 研究機関: 奈良先端科学技術大学院大学
• 研究代表者: 磯貝 彰 奈良先端科学技術大学院大学, バイオサイエンス研究科, 教授 (20011992)
• 研究分担者: 北野 英己 愛知教育大学, 教育学部, 助教授 (50144184) ; 鎌田 博 筑波大学, 生物科学系, 教授 (00169608) ; 崎山 文夫 大阪大学, 蛋白質研究所, 教授 (40029947) ; 神山 康夫 三重大学, 生物資源学部, 助教授 (80024579) ; 渡辺 正夫 東北大学, 農学部, 助手 (90240522)
• キーワード: 自家不和合性 / S遺伝子 / S-RNase / S-レセプターキナーゼ / 胚発生 / 変異体 / 不定胚誘導 / GTPase

研究概要

磯貝はアブラナ科植物につき,SLG(S糖タンパク質)のアンチセンス遺伝子を導入して得られた和合型の形質転換植物の形質が,交配によって後代に伝わること,形質の変化は柱頭側のみおきていることを明らかにした。さらにSRK(S-レセプタープロテインキナーゼ)について,そのキナーゼ領域を大腸菌で発現させ,自己燐酸化能があることを証明した。渡辺はアブラナ科植物のSLG,SRKについて,ゲノム遺伝子を単離し,それらをプロモーター領域を含め明らかにした。また,ゲノム中の類似遺伝子の存在とその一部のS遺伝子座への連鎖を証明した。崎山は,ニホンナシの自家不和合性を支配するS-RNaseを単離し,そのアミノ酸配列を決定し,保存領域を明らかにした。さらにこれをもとにcDNAライブラリーから相当する遺伝子を単離し,その塩基配列を決定した。神山は,トマトを材料として,これまでに明らかになっているS-RNaseの塩基配列のうちの可変領域についてそれらを相互にいれ換えたcDNAを作成し,これを形質転換する準備をすすめている。また,サツマイモについて,2次元電気泳動によって,S遺伝子座に特異的なスポットの存在を明らかにした。鎌田はニンジンを材料として,アブシジン酸による不定胚形成能の獲得の機構を解析し,この情報伝達に関わる遺伝子を単離した。さらにアラビドプシスからも,関連の遺伝子を単離した。北野はMUN受精卵処理による突然変異を利用して,イネの初期胚発生の多数の変異体を作出し,それらの遺伝的解析を行っている。塚谷はアラビドプシスを用いて,低分子GTPaseが,花粉管の伸長に関わっていることを証明し,この遺伝子産物がゴルジ体およびその周辺の小胞に局在することを明らかにした。

研究成果

• [文献書誌] S.Yamakawa,: "The sequences of S-receptor kinases(SRK)involved in self-incompatibility and their homologies to S-locus glycoproteins of Brassica campestris." Biosci. Biotech. Biochem.59. 161-162 (1995)
• [文献書誌] K,Hinata: "Evolutionary aspects of the S-related genes of the Brassica self-incompatibility systems: synonymous and nonsynonymous base substitutions." Genetics. 140. 1099-1104 (1995)
• [文献書誌] H.Shiba: "Breakdown of self-incompatibility in Brassica by the antisense RNA of SLG gene." Proc. Japan Academy. 71. 81-83 (1995)
• [文献書誌] G.Suzuki: "Molecular coloning of members of S-multigene family in self-incompatible Brassica campestris" Plant Cell Physiol.36. 1273-1280 (1995)
• [文献書誌] Nishio.T.,: "Registration of S alleles in Brassica campestris by restriction fragment sizes of SLGs" Theor. Appl. Genet.L.(in press).
• [文献書誌] Kowyama,Y.: "SLG/SRK-like genes are expressed in he reproductive tissues of Ipomoea trifida." Sex. Plant Reprod.8. 333-338 (1995)
• [文献書誌] Kowyama,Y: "Molecular characterization of a reproductive organ-specific cDNA clone, ISP11 from Ipomoea trifida." Breeding Sci. 45. 497-501 (1995)
• [文献書誌] N.Norioka: "Nucleotide sequences of cDNAs encoding S2-and S4-RNases from Japanese pear(Pyrus pyrifolia Nakai)." Plant Physiol.108. 1343 (1995)
• [文献書誌] T.Ishimizu: "Identification of histidine 31 and cysteine 95 in the active site of self-incompatibility associated S6-RNase in Nicotiana alata." J. Biochem,. 118. 1007-1013 (1995)
• [文献書誌] T.Hong: "Phenotype diversity of 188 rice embryo mutants." Dev. Gent.16. 298-310 (1995)
• [文献書誌] T.Hong: "Temperture-sensitive mutation, embryoless 1, affects both embryo and emdosperm development in rice" Plant Sci.108. 165-172 (1995)
• [文献書誌] H.Higashi: "The effects of reduced nitrogenous compounds suggests thta glutamine synthetase in involved in the development of somatic embryo in carrot." Plant Cell Tissue Organ Culture. (in press).
• [文献書誌] K.Sakamoto: "A amle-associated DNA sequence in a dioecious plant, Cnnabis sativa L." Plant Cell Physiol.36. 209-218 (1995)
• [文献書誌] T.Ueda: "Characterization and subcellular localozation of Arabidopsisi small GTP binding protein(Ara-4): conditional expression under control of promoter of the gene for heat-shocl protein HSP81-1." Mol. Gen. Genet.(in press).
• [文献書誌] T.Ueda: "Brefeldin A induces the accumulation of the unusula membrane structures in elongating tubes of Nicotiana tabacum L." J. Plant Physiol.(in press).