燐酸化チロシン残基を認識するSHZ領域を介する細胞内情報伝達機構の解析

1996 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 07307003
• 研究機関: 神戸大学
• 研究代表者: 山村 博平 神戸大学, 医学部, 教授 (90030882)
• 研究分担者: 岡田 雅人 大阪大学, 蛋白質研究所, 助教授 (10177058) ; 野澤 義則 岐阜大学, 医学部, 教授 (10021362) ; 山本 雅 東京大学, 医科学研究所, 教授 (40134621) ; 小野 功貴 神戸大学, 理学部, 教授 (10243297) ; 的崎 尚 神戸大学, 医学部・附属病院, 助手 (80252782)
• キーワード: SH2 / チロシンキナーゼ / Syk / SHp-2 / SHPS-1 / Fyn / チロシンホスファターゼ / パキシリン

研究概要

パキシリンは増殖分化、脱分極等の様々な細胞外刺激に応答してチロシンリン酸化されるが、チロシンリン酸化されたパキシリンがSH2領域を介してCsk及びCrkと会合する結果から、シグナル伝達関連分子のインテグイレイションに密接に関与することが明かとなった。SH2領域を2つ持つチロシンホスファターゼ、SHP-2がSrcファミリーチロシンキナーゼの活性化に関与することを明かにした。さらにSHP-2の生理作用を明らかにする目的でこのチロシンホスファターゼの標的基質蛋白質の同定、遺伝子クローニングを行った結果、pp120Kの全長のcDNAをクローニングした。その蛋白質をSHPS-1と名付け、モノクローナル抗体を作製した。この抗体を用いた種々実験の結果、増殖因子刺激によりSHPS-1はチロシンリン酸化を受けSHP-2と結合することが明かとなった。すなわちSHPS-1はSHP-2のアンカー蛋白質として働いている可能性が考えられる。Srcファミリーの一つであるFynからの情報伝達経路についてそのSH2領域と会合する蛋白質の検索を行った。p21がFynSH2と結合することからこの蛋白質について調べたところミオシン軽鎖調節分子2と類似していた。p21はCskによって燐酸化されることも同時に明らかになった。SH2を2つ持つチロシンキナーゼSykについて活性酸素によるB細胞における活性機序を調べた。B細胞受容体刺激同様SrcファミリーLynを必要とする活性化であることが判明した。やはりSH2を会するITAM構造上での活性化と推測された。このほかPKN、ホスホリパーゼD,卵母細胞25kD蛋白及びGM1とSH2の関係について調べたが現在のところ明確な結論はでていない。

研究成果

• [文献書誌] Maruyama,S.et.al.: "Physical and functional association of cortactin with Syk in human leukemic cell line K562." J.Biol.Chem.271(12). 6631-6635 (1996)
• [文献書誌] T,Noguchi.et.al.: "Characterization of a 115-kDa protein that binds to SH-PTP2,a protein-tyrosine phosphatase with SRC homology 2 domains,in Chinese hamster ovary cells." J.Biol.Chem.271(44). 27645-27651 (1996)
• [文献書誌] Mukai,H.et.al.: "Translocation of PKN from the cytosol to the nucleus induced by stresses." Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.93. 7639-7643 (1996)
• [文献書誌] T,Tezuka.et.al.: "Physical and functional association of the Cbl proto-oncogene product with a Src-family protein-tyrosine kinase,p53/p56lyn,in the B-cell antigen receptor-mediated signaling." J.Exp.Med.183. 675-680 (1996)
• [文献書誌] S.Yoshimura.et.al.: "Differential mRNA expression of phospholipase D (PLD) isozymes during cAMP-induced differentiation in C6 glioma cells." Biochem.Biophys.Res.Commun.225. 494-499 (1996)
• [文献書誌] Tamaru,T.et.al.: "Purification and Characterization of a p13suc1-Bound Serine/Threonine Kinase Expressed in Mature Rat Brain" Eur.J.Biochem.283. 152-159 (1996)