腸炎ビブリオの発症機構の毒素と定着因子からの分子生化学的研究

1996 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 07407008
• 研究機関: 大阪大学
• 研究代表者: 本田 武司 大阪大学, 微生物病研究所, 教授 (60029808)
• 研究分担者: 飯田 哲也 大阪大学, 微生物病研究所, 助手 (90221746) ; 余 明順 大阪大学, 微生物病研究所, 助手 (70093482) ; 山本 耕一郎 大阪大学, 微生物病研究所, 助教授 (30158274)
• キーワード: 耐熱性溶血毒 / 腸炎ビブリオ / 定着因子 / レセプター / リン酸化

研究概要

腸炎ビブリオの病理性発現機構について、つぎのようなことが明らかになった。
1.腸炎ビブリオの主要な病原因子である耐熱性溶血毒(TRH)とその類似毒素(TRH)の遺伝子(それぞれtdh、trh)は、腸炎ビブリオの染色体遺伝子上のごく限られた位置(互いに100kb内)に存在する事が分かった。また、一部のヒト由来腸炎ビブリオにはウレアーゼ産生株があること、このウレアーゼ産生株(ure遺伝子保有株)は常にTRH遺伝子(trh)を保有していること、しかしure遺伝子はtdhとtrh遺伝子の近傍に存在することを明らかにした。この付近は、病理性にかかわる「vilurence island」である可能性が考えられた。
2.TDH/TRHのレセプターを解析するためにRat-1細胞(TDH感受性)からニトロソグアニジン処理で耐性細胞(MRT1)を誘導した(TDHに酸性化した)。種々な解析でMRT1細胞は、TDHに対するレセプターを欠損していることが分かった。従って、この細胞を解析することによるTDH/TRHに対応するレセプター同定への道が開けた。
3.TDHの作用機構を生化学的に追求した結果、TDHは赤血球膜上で25kDaの蛋白をリン酸化させること、このリン酸化を阻害すると溶血も阻害されること、などから、TDHの生物活性発現に、特定の蛋白のリン酸化が伴っていることが明らかになった。

研究成果

• [文献書誌] Koike,N.et al.: "Rapid and differential detection of two analogous enterotoxins of Vibrio cholerae and enterotoxiqenic Escherichia coli by a modified" FEMS Immun.Med.Microbiol.(in press).
• [文献書誌] Iida,T.et al.: "Evidence for genetic linkage between the ure and trh genes in Vibrio parahaemolyticus." J.Med.Microbiol.(in press).
• [文献書誌] Sang,W.K.et al.: "Prevalence of diarrhoeagenic Escherichia coli in Kenyan children." J.Diarrhoeal Dis.Res.(in press).
• [文献書誌] Nagamune,K.et al.: "Intramolecular chaperone activity of the pro-region of Vibrio cholerae El Tor cytolyisn." J.Biological Chem.272(2). 1338-1343 (1997)
• [文献書誌] Yoh,M.et al.: "Phosphorylation of a 25kDa protein is induced by thermostable direct hemolysin of Vibrio parahamolyticus." Int.J.Biochem.Cell Biol.28. 1365-1369 (1996)
• [文献書誌] Nagayama,K.et al.: "Use of alkaline phosphatase-conjugated oligonucleotide probe for the gene encoding the bundle-forming pilus of enteropathogenic" J.Clin.Microbiol.34(11). 2819-2821 (1996)
• [文献書誌] Suthienkul,O.et al.: "Restriction fragment length polymorphism of the tdh and trh genes in clinical Vibrio parahaemolyticus." J.Clin.Microbiol.34(5). 1293-1295 (1996)
• [文献書誌] Sang,W.K.et al.: "Haemorrhagic colitis dus to Eschericha coli 0157:H7 in Kenya." J.Trop.Pediatrics.42. 118-119 (1996)
• [文献書誌] Whaybe,S.A.et al.: "Genetic analysis of the chromosomal region encodin lysophspholipa se L_2 of Vibrio cholerae 01." Biochemica Biophysica Acta. 1300. 1-4 (1996)
• [文献書誌] Shimaoka M.et al.: "Detection of the gene for toxic shock syndrome toxin 1 in Staphylococcus aureus by enzyme-labelled oligonucleotide probes." J.Med.Microbiol.44. 215-218 (1996)
• [文献書誌] suthienkul O.at al.: "Urease production correlates with possession of the trh gene in vibrio parahaemolyticus strains isorated in Thailand." J.Infect.Dis.172. 1405-1408 (1995)
• [文献書誌] Tang,G.O.at al.: "Ca^<2+-> independent cytotoxicity of Vibrio parahaemolytiucs thermostable direct hemolysin (TDH) on intestine 407,a cell line" FEMS Microbiol.Lett.134. 233-238 (1995)
• [文献書誌] 本田武司: "Clinical Infection & Chemotherapy" 大腸菌O-157感染症(基礎から見た腸管出血性大腸菌とその感染症), 2(4):38-41 (1996)
• [文献書誌] 島岡要他: "医学のあゆみ" 細菌性腸感染症と粘膜バリア, 122-129 (1996)
• [文献書誌] 松山純子他: "検査と技術" 食中毒, 24(11):884-891 (1996)
• [文献書誌] 山本耕一郎他: "モダンメディア" 細菌性腸感染症に対するワクチン現状, 42(9):394-399 (1996)