冠動脈の緊張亢進や内膜肥厚の防止に関する細胞分子生物学的研究

1995 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 07407022
• 研究種目: 一般研究(A)
• 研究機関: 九州大学
• 研究代表者: 金出 英夫 九州大学, 医学部, 教授 (80038851)
• 研究分担者: 西村 淳二 九州大学, 医学部, 講師 (90237727) ; 小林 誠 九州大学, 医学部, 助教授 (80225515)
• キーワード: 冠動脈攣縮 / 内膜肥厚 / 血管平滑筋 / 冠血管形成術 / 細胞周期 / 細胞増殖 / 細胞情報伝達

研究概要

本研究の目的は、冠動脈平滑筋細胞の緊張・増殖の制御とその破綻の機序、およびその防止法を細胞分子生物学的に明らかにすることにある。
1.本年度は、まず、光学的方法による生体用「細胞内イオン変化の連続・二次元測定システム」を、日本分光(株)と、共同開発した。
2.光学的測定法とReverse transcription polymerase chain rection(RTPCR)法を用いて。以下の研究成果を得た。
(1)アドレノデジュリン(AM)は前収縮させた冠動脈および腎動脈平滑筋標本の[Ca]iを低下させ、弛緩を引き起こした。RTPCR法によって、これらの平滑筋には、AM mRNAが発現していることを証明した。AMは冠循環および腎循環においてオートクリン/パラクリン型の血管緊張制御を行うことが示唆された。
(2)RTPCR法を用いて、豚冠動脈平滑筋細胞の全RNA標本中にβ1受容体mRNAの存在を証明した。プロスタグランジンF_<2α>による前収縮に対する弛緩効果の順(イソプロテレノール>ノルエピネフリン>エピネフリン)から、冠動脈ではβ1受容体優位であることが分かった。冠循環調節において、β1受容体刺激は重要な役割演じていることが明らかとなった。
(3)ラット大動脈初代培養平滑筋細胞において、AMは細胞周期進行(G0→G1)と共にc-fos mRNAを発現させることを明らかにした。その機序はA-キナーゼ依存性、[Ca]i非依存性であった。
(4)ATPはラット大動脈初代培養平滑筋細胞において、P_<2U>受容体を介してプログレッション増殖作用を示した。

研究成果

• [文献書誌] M. Ushio-Fukai: "Cytosolic calcium concentration-force relation during contractions in the rabbit femoral artery" Br J Pharmacol. 114. 329-338 (1995)
• [文献書誌] Y. Hirakawa: "Dual regulation of L-type Ca^<2+> channels by serotonin 2 recepror stimulation in vascular smooth muscle cells" Am J Physiol. 268. H544-H549 (1995)
• [文献書誌] Y. Miyagi: "Resting load regulates cytosolic calcium-force relationship of the contraction of bovine cerebrovascular smooth muscle" J Physiol. 484. 123-137 (1995)
• [文献書誌] Y. Miyagi: "Resting load regulates vascular sensitivity by a cytosolic Ca^<2+>-insensitive mechanism" Am J Physiol. 268. C1332-C1341 (1995)
• [文献書誌] K. Toyofuku: "Effects of U46619 on intracellular Ca^<++> concentration and tension in human umbilical artery" Am J Obstet Gynecol. 172. 1414-1421 (1995)
• [文献書誌] G. Hiroishi: "High-D-glucose stimulates the cell cycle from the G1 to S and M phases, but has no competent effect on the G0 phase, in vascular smooth muscle cells." Biochem Biophys Res Commun. 211. 619-629 (1995)
• [文献書誌] Y. Kureishi: "Adrenomedullin decreases both cytosolic Ca^<2+> concentration and Ca^<2+> sensitivity in pig coronary arterial smooth muscle." Biochem Biophys Res Commun. 212. 572-579 (1995)
• [文献書誌] J. Nishimura: "Evidence for the presence of endothelin ET_A receptors in endothelial cells in situ of aortic side of porcine aortic valve" Br J Pharmacol. 115. 1369-1376 (1995)
• [文献書誌] M. Kuroiwa: "The mechanism of endothelium-dependent relaxation induced by substance P in the porcine coronary artery" Br J Pharmacol. 116. 2040-2047 (1995)
• [文献書誌] H. Seguchi: "Autocrine regulation of the renal arterial tone by adrenomedullin" Biochem Biophys Res Commun. 215. 619-625 (1995)
• [文献書誌] H. Yoshimura: "The effects of midazolam on intracellular Ca^<2+> and tension in airway smooth muscle" Anesthesiology. 83. 1009-1020 (1995)
• [文献書誌] H. Jahan: "Both endothelin-1 and angiotensin-II act as progression growth factors but not competence growth factors in vascular smooth muscle cells in primary culture" Eur J Pharmacol. 295. 261-269 (1996)