血球分化増殖調節の分子機構と臨床的解析

1997 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 07407029
• 研究機関: 自治医科大学
• 研究代表者: 三浦 恭定 自治医科大学, 医学部, 教授 (60048965)
• 研究分担者: 室井 一男 自治医科大学, 医学部, 講師 (50190939) ; 今川 重彦 自治医科大学, 医学部, 講師 (60231164) ; 高徳 正昭 自治医科大学, 医学部, 助手 (20285787) ; 畠 清彦 自治医科大学, 医学部, 助教授 (80192699) ; 小松 則夫 自治医科大学, 医学部, 講師 (50186798)
• キーワード: 造血幹細胞 / 造血因子 / 受容体 / シグナル伝達 / 巨核球株細胞 / 赤芽球分化 / STAT転写因子群 / アポトーシス

研究概要

前年までの研究を更に発展させ次の成果を得るとともに3年間の研究のまとめをした.
1)造血因子依存性細胞株UT-7の亜株UT-7/GMはエリスロポエチン(EP)により赤芽球へ,トロンボポエチン(TP)によって巨核球へと分化する.EPによる赤芽球分化に際し,転写因子STAT5のみが活性化されSTAT1α,3はそれを抑制することがわかり,その作用機序につき遺伝子挿入実験により更に詳しく解明した.
2)EPによる受容体遺伝子の調節は細胞周期依存性であることを報告した.
3)TPのシグナル伝達にはprotein kinase Cとc-myc遺伝子の活性化を介する経路があること,又TPはEPとは別の情報伝達経路で赤芽球分化を起しうることを報告した.
4)EP遺伝子の調節に5-promotor領域にあるGATA結合配列が発現抑制に重要な役割を果していることを報告し,更にその詳細について検討した.
5)Fas,bcl-x等のアポトーシス関連遺伝子の役割につき検討した.
6)disalosyl-T抗原はglycophorin Aとともに正常の赤芽球分化に密接に関与することを報告した.
7)臨床的観察では先天性巨核球減少性血小板減少症のTP受容体遺伝子のDNA解析では突然変異は発見されなかった.また未熟なヒトCD34陽性細胞はTP受容体のうちK型のみ発現し,P型はTPと培養後3日目より発現することを見出し,これまで機能の分らなかったK型受容体の作用について興味深い示唆が得られた.
以上最終年度にも多くの新知見を得ることが出来,3年間を通じて研究計画はほぼ順調に推移した.

研究成果

• [文献書誌] Kikuchi,J., Furukawa,Y., Iwase,S., Miura,Y., et al.: "Polyploidization and functional maturation are two distinct processes during meqakaryocytic differentiation." Blood. 89. 3980-3990 (1997)
• [文献書誌] Imagawa,S., Yamamoto,M., Miura,Y.: "Negative requlation of the erythropoietin gene expression by the GATA transcription factors." Blood. 89. 1430-1439 (1997)
• [文献書誌] Komatsu,N., Kirito,K., Kashii,Y., Miura,Y., et al.: "Cell-cycle dependent requlation of erythropoientin receptor gene." Blood. 89. 1182-1188 (1997)
• [文献書誌] Komatsu,N., Kirito,K., Shimizu,R., Miura,Y., et al.: "In vitro development of reythroid and megakaryoeytic cells from a UT-7 subline,UT-7/GM." Blood. 89. 4021-4033 (1997)
• [文献書誌] Kunitama,M., Shimizu,R., Miura,Y., Komatsu,N., et al.: "Protein kinase C and c-myc gene activation pathways in thrambopoietin signal transduction." Biochem.Biophys.Res.Commun.231. 290-294 (1997)
• [文献書誌] Takatoku,M., Kametaka,M., Miura,Y., Komatsu,N., et al.: "Identification of functional domains of the human thrombopoietin receptor required for growth and differentiation of megakaryocytic cells." J.Biol.Chem.272. 7259-7263 (1997)