胸腺リンパ球の分化・選択・クローン排除の微小環境

1997 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 07407066
• 研究機関: 東北大学
• 研究代表者: 伊藤 恒敏 東北大学, 医学部, 教授 (90004746)
• 研究分担者: 八木 秀樹 東北大学, 医学部, 助手 (40250740) ; 中村 雅典 東北大学, 医学部, 助教授 (50180394)
• キーワード: 胸腺 / 胸腺リンパ球 / 分化 / 選択 / クローン排除 / 微小環境 / アポトーシス / 細胞死

研究概要

本年度は昨年度に引き続き、(1)胸腺リンパ球の細胞死の問題、(2)分画されたリンパ球の形態学的解析、(3)胸腺内のマクロファージの同定・局在・分類の3点に集中して解析を進めた。
胸腺リンパ球の細胞死の問題については正常胸腺のアポトーシスの形態学的検索により、胸腺リンパ球は生理的にはアポトーシス(DNA断片化を伴う細胞死)を起こしていないこと、また多くの胸腺リンパ球の細胞死は古くから言われているようにピクノ-シスであることが判明した。ステロイド投与による劇的な胸腺細胞死も基本的にはピクノ-シスによることが確認された。現在、ピクノ-シスが生じる機構の解明について検討中である。
複数の表面抗原の有無・多寡および細胞の大きさなどを指標として自動細胞分取装置で分画した胸腺リンパ球を形態学的に検索を行うという実験も進展した。電子顕微鏡による検索で、CD4が中間的に陽性のものは必ずしもCD4/CD8double positiveからsingle positiveに移行する中間段階ではない等の新しい事実が判明した。このことは今後、胸腺リンパ球のin situでの解明に電顕が有用なツールとなることを示唆しており、胸腺組織での電顕解析に着手したところである。
胸腺内マクロファージの同定・局在に関しては報告が少ない。二重蛍光免疫染色法により胸腺マクロファージを4種の抗体で染色し、胸腺マクロファージの亜群の解析を進めている。マウス胸腺で少なくとも3種類の、マーカーも形態も局在も異なるマクロファージを同定・分類した。その中で、皮質の大型の樹状型マクロファージは貧食機能を持つが、髄質に多い球形の小型マクロファージは全く貧食機能を発揮しないことがこれまでの解析で判明した。目下、この2者のマクロファージの異同をさらに追求中である。

研究成果

• [文献書誌] Yagi, H, et al.: "Defect of thymocyte emigration in a T-cell deficiency strain(CTS)of mouse." J.Immunol.157. 3412-3419 (1996)
• [文献書誌] Nakamura, M., et al.: "DNA fragmentation is not the primaryevent in glucocorticoid-induced thymocyte death in vivo" Eur.J.Immunol. 27. 999-1004 (1997)
• [文献書誌] Soga, H., et al.: "Heterogeneity of thymic macrophages. I.Immunohistochemical analysis." Arch.Histol.Cytol.60. 53-63 (1997)
• [文献書誌] Ishii, T., et al.: "Glucocorticoid-induced thymocyte death in murine thymus" Arch.Histol.Cytol. 60. 65-78 (1997)
• [文献書誌] Koja, S., et al.: "Induction of tolerance to islet and skin allografts by intrathymic inoculation of thymic stromal cell clones in mice." Transplantation Proc.29. 765-766 (1997)
• [文献書誌] Yagi, H., et al.: "Ultrastructural analysis of mouse thymocyte subpopulations." Eur.J.Immunol.27. 2680-2687 (1997)