| 研究課題/領域番号 |
07408026
|
|---|
| 研究種目 |
基盤研究(A)
|
| 配分区分 | 補助金 |
|---|
| 応募区分 | 一般 |
|---|
| 研究分野 |
神経・筋肉生理学
|
|---|
| 研究機関 | 東京大学 |
|---|
研究代表者 |
高橋 智幸 東京大学, 大学院・医学系研究科, 教授 (40092415)
|
|---|
| 研究分担者 |
辻本 哲宏 東京大学, 大学院・医学系研究科, 助手 (40212055)
真鍋 俊也 東京大学, 大学院・医学系研究科, 講師 (70251212)
小野寺 加代子 東京大学, 大学院・医学系研究科, 講師 (00053091)
|
|---|
| 研究期間 (年度) |
1995 – 1997
|
| キーワード | PKC / NMDA受容体 / ピペット内潅流 / ホルボールエステル / Mgブロック / ホールセル記録 / リン酸化 / シナプス可塑性 |
|---|
| 研究概要 |
記憶学習の細胞内メカニズムであるシナプス可塑性の根底にあるシナプス感受性調節機構を明らかにする目的で研究を行った。1.ラット前脳(海馬を含む)より後シナプス膜(PSD)分画を抽出し、この分画中のAMPA型グルタミン酸受容体(GluR)がCaカルモジュリン依存的にリン酸化されること、およびGluRとCamKIIが共沈降することが見いだされ、両者が複合体を形成することが示唆された。この結果は、長期増強の発現のメカニズムにGluRのCaカルモジュリン依存的リン酸化が関与するとの仮説を支持する。2.NMDA受容体サブユニットの役割を小脳顆粒細胞において、ノックアウトマウスとスライスパッチクランプ法によって解析した。生後発生後期に発現するε1、ε3サブユニットの役割を検討した結果、前者はNMDA受容体シナプス応答(NMDA-EPSC)の持続時間を短縮し、後者はNMDA-EPSCのMg感受性を下げることによって成熟型のシナプス受容体が形成されることがが明らかになった。また、マウス海馬CA1領域に誘発される長期抑圧(LTD)はNMDA受容体に媒介され特に生誕直後ではε2サブユニットが主要な役割を演じることが明らかとなった。3.延髄台形核(MNTB)ニューロンに前蝸牛核から入力するEPSCを誘発してホルボールエステルの効果を検討した。パッチピペット内潅流によっPKCの活性化剤ホルボールエステルPDBu(1μM)を細胞内投与したところ、注入後数分以内にNMDA-EPSCが増大した。これに対してAMPA-EPSCを記録してPDBuを投与したところ、作用は全く認められなかった。これらの結果はホルボールエステルの作用がNMDA受容体に特異的であり、かつ後シナプス性であることを示唆する。またこれらPKC活性剤の効果はMgブロックの解除によるものでなく、NMDA受容体がPKCによってリン酸化されることによると考えられる。PKCによるNMDA-EPSCの増大は、LTPの誘発を促進すると推論される。
|
