サイトカインによるシグナル伝達機構の解析

1998 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 07409001
• 研究機関: 東京大学
• 研究代表者: 宮島 篤 東京大学, 分子細胞生物学研究所, 教授 (50135232)
• 研究分担者: 木下 大成 東京大学, 分子細胞生物学研究所, 助手 (40301113) ; 原 孝彦 東京大学, 分子細胞生物学研究所, 助教授 (80280949)
• キーワード: サイトカイン / サイトカイン受容体 / シグナル伝達 / 造血 / 血管内皮 / 発生 / 誘導遺伝子 / 細胞分化

研究概要

我々はすでに、EPOに応答して分化する赤芽球SKT6細胞においては,EPO受容体で活性化されたSTAT5がこの細胞の分化に重要であるとの結果を得ている。retrovirus vectorでbicistronic expressionを用いてEPOで活性化されるシグナル分子などを胎生肝由来の血液細胞に導入し、赤芽球分化への関与を検討した。結果は基本的にはSKT6細胞で得られた結果を支持するものであった。この発現システムは初代培養細胞に遺伝子導入し機能を調べることができるので、今後様々な系での応用が可能であると思われる。
マウスOSM受容体のcDNAをクローニングして、機能的なOSM受容体の再構成を行った。マウスOSMはOSM特異的なOSM受容体β鎖とgp130からなる受容体にのみ作用し、ヒトとは異りLIF受容体にはcrossしないことを示した。OSM受容体遺伝子座の決定を行った。さらに、現在OSM受容体遺伝子のノックアウトマウスを当研究室にて作成中である。
我々はOSMが造血発生の場として知られている胎生期のAGM(aorta/gonad/mesonephros)領域由来の細胞を培養するin vitro系にてOSMが血球産生と血管内皮細胞に共通の前駆細胞hemangioblastsに作用する可能性を示した。そこで、この培養系を用いて、血球産生に必須な転写因子c-myb,AML-1の作用を解析した。また、hemangioblast様の細胞株を樹立し、この細胞でOSM誘導性遺伝子の探索を行い、stress誘導性のGADD45とMyD118に類似した新規遺伝子OIG37を得た。OIG37には細胞増殖を抑制する機能が見いだされた。

研究成果

• [文献書誌] Chida, D.et al.: "Transcriptional regulation of the b-casein gene by cytokines : cross-talk between STAT5 and other signaling molecules" Mol.Endocrinol.12. 1972-1805 (1998)
• [文献書誌] Tanaka, M.et al.: "Reconstitution of the functional mouse oncostatin M (OSM) receptor : molecular cloning of the mouse OSM receptor b subunit." Blood. 93. 804-815 (1999)
• [文献書誌] Chida, D.et al.: "Role of cytokine signaling molecules in erythrold defferentiation of mouse fetal liver hematopoietic cells : functional analvsis of signaling molecules by retrovirus-mediated gene expression." Blood. (in press). (1999)
• [文献書誌] Hara, T.et al.: "Distinct roles of oncostatin M and leukemia inhibitory factor for the development of germ celles and testis" Develop.Biol.201. 144-153 (1999)
• [文献書誌] Miyajima, A.et al.: "Cytokine signaling for proliferation, survival, and death in hematopoietic cells" Int.j.Hematol.(in press). (1999)