サッカロミセス酵母の耐塩機構に関する分子生物学的研究

1996 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 07456050
• 研究機関: 広島大学
• 研究代表者: 宮川 都吉 広島大学, 工学部, 教授 (10116676)
• 研究分担者: 平田 大 広島大学, 工学部, 助手 (30243603)
• キーワード: Yeast / Salt tolerance / calcineurin / cation homeostasis

研究概要

1.カルシニューリン破壊株の塩感受性を高発現により抑圧する遺伝子の解析
このスクリーニングで転写因子をコードする遺伝子MIG1、MIG2および膜蛋白質をコードする遺伝子MSA2およびMSA4が取得されたので、これらの機能の解析を行なった。
(1)転写因子Mig1およびMig2の役割
MIG1遺伝子を破壊すると顕著に塩感受性が高まったが、MIG2破壊の効果はわずかであった。これらの転写因子は、いずれも塩耐性に関与していることが明らかになった。二重破壊株を作成してその影響を調査している。
(2)トランスポーターMsa2およびMsa4の役割
MSA2破壊の塩感受性に及ぼす影響は小さかった。この遺伝子に隣接して相同性の高い遺伝子MSA4を見い出したので、MSA2MSA4二重破壊株を作成して表現型を調べている。
(3)MIG2とMSA2の機能的関連
ノーザン解析の結果、MIG2破壊株ではMSA2遺伝子の転写が抑制されていたことから、MIGIは、MSAの転写に関与していることが明らかとなった。
2.食塩感受性変異株の変異遺伝子の解析
食塩感受性変異株を1370株取得し、相補性試験を行ない30の相補グループに分類した。カルシニューリンの高発現により変異形質が抑圧されなかった、カルシニューリンの下流で機能すると予想される遺伝子の変異が5つ得られた。これらの変異を相補する遺伝子を取得し解析を行なっている。

研究成果

• [文献書誌] K. Miyahara: "The involvement of the yeast multidrugresistance protein Pdrs and Sng2 in cation resistance" FEBS Letters. 399・3. 317-320 (1996)
• [文献書誌] Z. Cui: "The MRP sudfamily of ABC transporter is important for the tolerance of yeast to organic anions" J. Biol. Chem.271・25. 14712-14716 (1996)
• [文献書誌] T. Nakamura: "Genetic evideuce for the functional redundauey of the CN ad Mpkl mediated pathways" Mol. Gen. Genet.251・2. 211-219 (1996)
• [文献書誌] I. Farcasanu: "The fote of Mu^<25> in Saccharouyces cerevisial cells as revealed by EPR." Eur. J. Biochem.60・3. 468-471 (1996)
• [文献書誌] P. Clifter: "SYR2, a gere necessauy for syriugowcisr in Saccharouyces cereuisiae" Microbiology. 142. 477-484 (1996)
• [文献書誌] K. Miyahara: "yAP1 ad yAP2 mediaed, heat shock-inducible trauscriptlonal activation of ABC gcues." Curr. Genet. 29. 103-105 (1996)
• [文献書誌] 平田大: "細胞周期制御の分子機構(分担執筆)" 共立出版, 8 (1996)