ペスティウイルス及びC型肝炎ウイルスの成熟複製機構に関する研究

1996 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 07456137
• 研究機関: 国立予防衛生研究所
• 研究代表者: 松浦 善治 国立予防衛生研究所, ウイルス第二部, 室長 (50157252)
• 研究分担者: 真鍋 昇 京都大学, 農学部, 助教授 (80243070) ; 宮村 達男 国立予防衛生研究所, ウイルス第二部, 部長 (90100099)
• キーワード: C型肝炎ウイルス / ペスティウイルス / ウイルスの成熟機構

研究概要

1)HCVコア蛋白によるアポトーシスの誘導
哺乳動物細胞でも遺伝子を発現できる組換えバキュロウイルスを用いてHCV遺伝子の発現を各種動物細胞で行った。その結果HCVのコア蛋白がアポトーシスの誘導に重要な役割を演じていることが明らかとなった。
2)HCVのminigene RNAの細胞内での合成系の構築
T7RNAポリメラーゼを発現する非増殖型の組換えウイルスを作製し、細胞質内に予めポリメラーゼを産生しておき、そこへHCVの複製に必須と考えられている5'および3'の非翻訳領域の間にレポーターとしてルシフェラーゼ遺伝子を持ったHCVのミニジーンプラスミドをトランスフェクトして、細胞内で効率よくミニジーンRNAを合成する系を構築した。このシステムを用いてHCVミニジーンRNAを極めて効率よく翻訳できるヒト肝癌細胞由来の細胞を見いだした。この細胞株の発見は未だ効率の良い細胞培養系のないHCVの複製機構を解析する上で極めて意義深いものと思われる。
3)コア蛋白とウイルス遺伝子との特異結合領域の同定
昨年報告した細胞内でのコア蛋白とウイルスRNAの特異的な結合を検出できる系を用いて、ウイルスRNAおよびコア蛋白に存在する特異結合領域を同定できた。

研究成果

• [文献書誌] Suzuki T.: "Hepatitis C virus infection and hepatocellular carcinoma." Liver. 16. 221-224 (1996)
• [文献書誌] Aizaki H.: "Mother to child transmission of a hepatitis C virus variant with an insertional mutation in its hypervariable region." J.Hepatol.25. 608-613 (1996)
• [文献書誌] Koike K.: "Sialadenitis resembling Sjogren's syndrome in hepatitis C virus transgenic mice." Proc.Natl.Acad.Sci.USA.(印刷中). (1997)
• [文献書誌] Barba G.: "Hepatitis C virus core protein shows a cytoplasmic localization and associates to cellular lipid storage droplets." Proc.Natl.Acad.Sci.USA.(印刷中). (1997)
• [文献書誌] Ruggieri A.: "Sensitization to Fas-mediated Apoptosis by Hepatitis C Virus Core Protein." Virology. (印刷中). (1997)
• [文献書誌] Manabe N.: "Signal transmission of granulosa cell apoptosis in the atretic antral follicles in the pig ovaries." J.Reprod.Dev.(印刷中). (1996)
• [文献書誌] Matsuura Y.: "Vaccine 97" Chanock R.M.,Ginsberg H.S.,Brown F.,and Lerner R.A.(印刷中),