1995 年度実績報告書

動物リン脂質中間代謝諸酵素に関する分子生物学的検討

研究課題

研究課題/領域番号	07457044
研究種目	一般研究(B)
研究機関	札幌医科大学
研究代表者	加納英雄札幌医科大学, 医学部, 教授 (70045475)
研究分担者	今井伸一札幌医科大学, 医学部, 助手 (20213209) 甲斐正広札幌医科大学, 医学部, 助手 (80260777) 和田郁夫札幌医科大学, 医学部, 講師 (40182969) 坂根郁夫札幌医科大学, 医学部, 講師 (10183815)
キーワード	ジアシルグリセロールキナーゼ / ホスファチジン酸ホスファターゼ / リン脂質 / シグナル伝達 / cDNAクローニング / プレクストリン相同部位 / 亜鉛フィンガー / EF-ハンド
研究概要	ジアシルグリセロールキナーゼ(DGK)とホスファチジン酸ホスファターゼ(PAP)の分子生物学的検討を行っている。 1.DGK.第4番目のアイソザイムDGKδのcDNAクローニングに成功した(坂根等、JBC印刷中)。この酵素はPHドメインを持つほか、そのC-端配列がチロシンキナーゼのEPH-ファミリーと高い相同性を示す。その他の構造上の特徴から、このアイソザイムは、これまでクローン化されたαからγまでのDGKとは区別されるサブファミリーに属することが分かった。DGKαのIL-2シグナル伝達における役割を、スペインのグループとの共同研究により明らかにした(Flores et al.JBC印刷中)。T-cell receptor 活性化時に、DGKαの核マトリックスへの移行が、PI turnoverやチロシンリン酸化とは別のメカニズムで起こることを発見した(和田等、執筆中)。α、β、γの3種のEFハンドはCa^<2+>結合に対する親和性とCa^<2+>結合時のconformation変化が互いに異なることが分かった(山田等執筆中)。英国との共同研究によりDGKγのヒト染色体マッピングを行った(Curr.Eye Res.14,1041,-95). 2.PAP ブタ胸線細胞表面膜結合性の糖蛋白質である、35kDa酵素のN-端配列が、マウス培養細胞でH_2O_2により誘導される部分的cDNAクローン(HIC53)の内部配列と一致することを発見した。PCR増幅により得られたヒトとマウスのcDNAを293細胞で発現させたところ、PAP活性が検出できた。HIC53の機能は不明であり、またreading frameに誤りがあったが、この酵素の最初のクローニングに成功した(甲斐等投稿準備中)。

研究成果

(8件)

すべてその他

すべて文献書誌 (8件)

[文献書誌] Dada,I.: "chaperon function of calreticulin when expressed in the endoplasmic reticulleem as the membrans ancbred and stuble fows" :J.Biol.chem.270. 20298-20304 (1995)
[文献書誌] Fitzgibbon,J.: "Lscalisation of the gene encoding diacylglycerol kinsse -3(DAGk3)to human chromosome 3g27-28 and mouse chromasome 16." Curr.Eye Res.14. 1041-1043 (1995)
[文献書誌] Kanoh,H.: "molecular properties of enzymes involved in diacylglycerol and phosphatidate metabolism." J.Lipid Med.Cell.Signal. (印刷中).
[文献書誌] Sakane.F.: "Molecular cloning of a diacylglycerol kinase isozyme with a pleckstrin homology domain and a C-terminal teil similar to those of the EPH tamily of protgaintyrosino kinases." J.Biol.Chem.(印刷中).
[文献書誌] Flores.I.: "phosphatidicacid generation through IL2 ovduced α-diacylglyycerol kinase aclivation is an essential step on IL-2-mediated lymphocyte proliferation." J.Biol.Chem.(印刷中).
[文献書誌] Sakane,F.: "Diacylglycerol kinase α without rinc fingers possesses the enjeyme catalytic activity" Biochem.J.(印刷中).
[文献書誌] Kanoh,H.(共同執筆): "Oxford University press.London,U.K.(印刷中)" Diacylglycerol kinase in “Guide book on calcium binding proteins.
[文献書誌] 加納英雄(共同執筆): "廣川書店(印刷中)" DGキナーゼ(Neuroscience 講座Vセカンドメッセンジャーと産生酵素).

1995 年度 実績報告書

動物リン脂質中間代謝諸酵素に関する分子生物学的検討

研究代表者

加納 英雄 札幌医科大学, 医学部, 教授 (70045475)

研究成果

[文献書誌] Dada,I.: "chaperon function of calreticulin when expressed in the endoplasmic reticulleem as the membrans ancbred and stuble fows" :J.Biol.chem.270. 20298-20304 (1995)

[文献書誌] Fitzgibbon,J.: "Lscalisation of the gene encoding diacylglycerol kinsse -3(DAGk3)to human chromosome 3g27-28 and mouse chromasome 16." Curr.Eye Res.14. 1041-1043 (1995)

[文献書誌] Kanoh,H.: "molecular properties of enzymes involved in diacylglycerol and phosphatidate metabolism." J.Lipid Med.Cell.Signal. (印刷中).

[文献書誌] Sakane.F.: "Molecular cloning of a diacylglycerol kinase isozyme with a pleckstrin homology domain and a C-terminal teil similar to those of the EPH tamily of protgaintyrosino kinases." J.Biol.Chem.(印刷中).

[文献書誌] Flores.I.: "phosphatidicacid generation through IL2 ovduced α-diacylglyycerol kinase aclivation is an essential step on IL-2-mediated lymphocyte proliferation." J.Biol.Chem.(印刷中).

[文献書誌] Sakane,F.: "Diacylglycerol kinase α without rinc fingers possesses the enjeyme catalytic activity" Biochem.J.(印刷中).

[文献書誌] Kanoh,H.(共同執筆): "Oxford University press.London,U.K.(印刷中)" Diacylglycerol kinase in “Guide book on calcium binding proteins.

[文献書誌] 加納英雄(共同執筆): "廣川書店(印刷中)" DGキナーゼ(Neuroscience 講座Vセカンドメッセンジャーと産生酵素).

1995 年度実績報告書

加納英雄札幌医科大学, 医学部, 教授 (70045475)