| 研究概要 |
これまで我々は下垂体特異的蛋白転写活性因子Pit-1の蛋白および遺伝子発現をラットおよびヒト下垂体・下垂体腺腫において検討し,機能特異性があるとされるisoformであるPit-1 β,Pit-1 Tに特異的なアミノ酸配列に対する抗体を作成し免疫組織化学(IHC)を行った。今年度は特異的なoligo-nucleotide probeを作成してnon-radioisotopic in situ hybridization (ISH)を各種腺腫において検討し,Pit-1βはGH細胞,Pit-1TはTSH細胞により強く発現し,それぞれ機能分化に関与する事を報告した。
さらにエストロジェン・甲状腺ホルモン(T3)・レチノイドなどのレセプターとPit-1の相互作用に注目し,これらのレセプターの局在をIHCおよびISH法を用いて検討した結果,PRL産生腺腫でEsgrogen ReceptorとPit-1の共存を高率で見いだし,またT3,レチノイドと二量体を形成するRetinoid X receptorとPit-1蛋白,mRNAの同一細胞での共存を高感度のCatalyzed signal amplifi-cation法,Combined-ISH-IHC法を用いて確認し,報告した。GHRH-receptor(R)に関しては微量遺伝子を組織切片上でPolymerase chain reaction (PCR)を用いて増幅し検出するin situ PCR法を導入し,GH産生細胞の機能分化・細胞増殖への関与を細胞レベルで証明すべく検討を開始した。GH産生腺腫の動物モデルとされるヒトGHRH transgenic ratの過形成およびGH腺腫おいてGHRHRの強い発現がPit-1蛋白,mRNAとともに認められ,GHRHRとPit-1の共働作用を強く示唆すると考えられた。ヒト下垂体腺腫においても同様の所見を得ており,その一部を報告した。
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