1996 年度実績報告書

核内転写因子発現遮断による動脈硬化症の遺伝子治療(アンチセンス核酸固定法による人工血管作製)

研究課題

研究課題/領域番号	07457174
研究機関	鹿児島大学
研究代表者	北島勲鹿児島大学, 医学部, 助教授 (50214797)
研究分担者	米澤傑鹿児島大学, 医学部, 助教授 (10175002) 明石満鹿児島大学, 工学部, 教授 (20145460) 丸山征郎鹿児島大学, 医学部, 教授 (20082282)
キーワード	血管平滑筋細胞 / トロンビン / アンチセンスオリゴ / NF-κB / マウス / LPS / エンドトキシンショック / 人工血管
研究概要	本年度は申請した実験計画の最終年であったがほぼ予定していた研究を遂行することができた。 1)トロンビンにより培養血管平滑筋細胞は約350%増加した。さらに、NF-κBp65に対するアンチセンスオリゴ(ODN)投与により、その細胞増殖率を135%以内に抑制できた。 2)ODNの動物への実験:マウスの腹腔内に投与したときのODNの代謝動態を検討した。その結果、血清中内では3-4時間の半減期であったが、肝臓と腎臓に24-48時間貯留することを確認した。さらに、アンチセンスNF-κBp65のin vivoにおける効果を判定するため、LPSによるエンドトキシンショックモデルマウスを利用した。このモデルでは約90%が2日以内に死亡したが、アンチセンス投与群は死亡率が30%以下に減少した。アンチセンスNF-κB投与により血清中のIL-6と、肝臓、腎臓、肺におけるLPS誘導によるTNF-α,IL-6,MHC class II mRNAの発現が著明に抑制された。以上は、生体内にODNを投与しても臓器集積性がありかつ生物学的活性を有することを示すものである。 3)ODNを固定させるための医用材料の検討:人工血管の素材を用い、そのフィルム上におけるMG63細胞の接着性を位相差顕微鏡を用いて検討した。AAm膜上においては細胞接着は認められず、AAc上では細胞はクラスターを形成し増殖した。DMAPAAフィルム上では1個1個が分離して増殖した。線維芽細胞、血管平滑筋の増殖抑制を誘導するアンチセンス核酸の分子設計とその人工血管上への固定法を検討してゆくため研究を継続してゆく予定である。

研究成果

(8件)

すべてその他

すべて文献書誌 (8件)

[文献書誌] Watanebe,O.,et al.: "Greatly raised vascular endothelial growth factor (VEGF) in POEMS syndrome." Lancet. 347. 702-702 (1996)
[文献書誌] Kang,S.H.,et al.: "Binding and functional effects of transcriptional fector,Sp-1 on the murine interleukin-6 promotor." J.Biol.Chem.271. 7330-7335 (1996)
[文献書誌] Kitajima,I.,et al.: "Induction of apoptosis in murine clonal osteoblasts expressed by human T-cell leukemia virus type I tax by NF-κB and TNF-α." J.Bone.Miner.Res.11. 200-210 (1996)
[文献書誌] Kitajima,I.,et al.: "Ceramide-induced nuclear translocation of NF-κB is a potential mediator of the apoptotic response to TNF-a in murine clonal osteoblasts." BONE. 19(3). 305-306 (1996)
[文献書誌] Kitajima,I.,et al.: "Enhanced E-cadherin expression and increased calcium-dependent cell-cell adhesion in human T-cell leukemia virus type I tax expressing PC12" J.Cell.Sci.109. 609-617 (1996)
[文献書誌] Ishidou,Y.,et al.: "Enhanced expression of type 1 receptor for bone morphogene proteins during bone formation." J.Bone.Miner.Res.10. 1651-1659 (1995)
[文献書誌] Kitajima,I.,et al.: "Therapeutic application of antisense oligodeoxynucleotides to inflammation" Kyusyu University Press, 171 (1996)
[文献書誌] 北島勲: "サイトカイン,アンチセンス療法" メディカルレビュー社, 255 (1996)

1996 年度 実績報告書

核内転写因子発現遮断による動脈硬化症の遺伝子治療(アンチセンス核酸固定法による人工血管作製)

研究代表者

北島 勲 鹿児島大学, 医学部, 助教授 (50214797)

研究成果

[文献書誌] Watanebe,O.,et al.: "Greatly raised vascular endothelial growth factor (VEGF) in POEMS syndrome." Lancet. 347. 702-702 (1996)

[文献書誌] Kang,S.H.,et al.: "Binding and functional effects of transcriptional fector,Sp-1 on the murine interleukin-6 promotor." J.Biol.Chem.271. 7330-7335 (1996)

[文献書誌] Kitajima,I.,et al.: "Induction of apoptosis in murine clonal osteoblasts expressed by human T-cell leukemia virus type I tax by NF-κB and TNF-α." J.Bone.Miner.Res.11. 200-210 (1996)

[文献書誌] Kitajima,I.,et al.: "Ceramide-induced nuclear translocation of NF-κB is a potential mediator of the apoptotic response to TNF-a in murine clonal osteoblasts." BONE. 19(3). 305-306 (1996)

[文献書誌] Kitajima,I.,et al.: "Enhanced E-cadherin expression and increased calcium-dependent cell-cell adhesion in human T-cell leukemia virus type I tax expressing PC12" J.Cell.Sci.109. 609-617 (1996)

[文献書誌] Ishidou,Y.,et al.: "Enhanced expression of type 1 receptor for bone morphogene proteins during bone formation." J.Bone.Miner.Res.10. 1651-1659 (1995)

[文献書誌] Kitajima,I.,et al.: "Therapeutic application of antisense oligodeoxynucleotides to inflammation" Kyusyu University Press, 171 (1996)

[文献書誌] 北島勲: "サイトカイン,アンチセンス療法" メディカルレビュー社, 255 (1996)

1996 年度実績報告書

北島勲鹿児島大学, 医学部, 助教授 (50214797)