転写因子NF-κBを介した甲状腺刺激ホルモン(TSH)作用に関する研究

1996 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 07457222
• 研究機関: 名古屋大学
• 研究代表者: 妹尾 久雄 名古屋大学, 環境医学研究所, 教授 (40135380)
• 研究分担者: 今井 常夫 名古屋大学, 医学部, 助手 (80252245) ; 長屋 敬 名古屋大学, 環境医学研究所, 助手 (80262913) ; 神部 福司 名古屋大学, 環境医学研究所, 助手 (00211871) ; 村田 善晴 名古屋大学, 環境医学研究所, 助教授 (80174308)
• キーワード: NFκB(Nuclear factor kappa B) / 甲状腺癌 / スーパーオキシドディスムターゼ(SOD) / グルタチオンペルオキシダーゼ(GPX) / 甲状腺刺激ホルモン / 腫瘍壊死因子(Tumor necrotic factor=TNF)

研究概要

1.FRTL-5細胞を用いたNK-κB活性化機構に関する研究
TNFαは、主にNF-κBの活性化によりIL-6などの発現を促進している。一方、TSHは、自己免疫性甲状腺疾患の病態を増悪させることが示唆されている。そこで、TNFαによるNF-κBの活性化にTSHがどの様に関与するかを検討した。TNFα非刺激ではIL-6mRNAの発現は認められなかった。TNFαによるIL-6mRNAの発現誘導は、TSH存在下でのみ認められた。TNFα非刺激では、NF-κBの活性化は認められず、TSH存在下ではTNFα刺激によりp50ホモダイマーおよびp50-p65ヘテロダイマーが誘導された。しかしながらTSH非存在下ではp50ホモダイマーのみが誘導された。
NK-κBのp50は、DNA結合能を有するが、転写活性ドメインを欠き、p50ホモダイマーは主に転写を抑制するのに対し、p65は転写活性ドメインを有し、p50-p65ヘテロダイマーは転写に促進的に作用するとされている。これらの報告は、TNFαによるIL-6mRNAの発現誘導がTSH存在下のみで観察される今回の成績と合致する。自己免疫性甲状腺疾患におけるTSHの抑制は、TNFαによる甲状腺濾胞細胞の活性型NF-κBの誘導を抑制することにより病態を改善することが示唆された。
2.甲状腺癌におけるスーパーオキシドディスムターゼ(SOD)およびグルタチオンペルオキシダーゼ(GPX)発現に関する研究
外科的に摘出された甲状腺癌(乳頭癌13例、未分化癌1例)およびその付随正常組織からtotal RNAを抽出し、ノーザンブロット解析によりMn-SOD,GPX mRNAの発現を検討した。Mn-SOD mRNAの正常組織における発現量に対する比腫瘍組織の発現量の比(T/N ratio)は、リンパ節転移陽性群で有意の増加が認められた。GPX mRNAの発現には差が認められなかった。腺外浸潤とMn-SOD,GPX mRNAのT/N ratio検討ではいずれも有意差を認めず、TSH抑制療法の有無でも、一定の傾向は認められなかった。リンパ節転移を認める甲状腺癌組織にMn-SOD mRNAの発現が増加していることは、腫瘍細胞が免疫担当細胞からの攻撃を効率的に回避する機構の一部と考えられた。

研究成果

• [文献書誌] Miyazaki T,他: "Molecular cloning of rat ZAKI-4 gene." Environmental Medicine. 40(印刷中). (1996)
• [文献書誌] Nagaya T,他: "Molecular cloning of a thyroid hormone receptor interacting protein." Environmental Medicine. 40(印刷中). (1996)
• [文献書誌] Nagaya T,他: "Induction of transcription factor NF-κB by tumor necrosis factor α and interferon β in human glioma cell lines." Environmental Medicine. 40(印刷中). (1996)
• [文献書誌] Kikumori T,他: "Activation of nuclear factor-kappa B by tumor necrosis factor-α in rat thyroid FRTL-5 cells." Environmental Medicine. 40(印刷中). (1996)
• [文献書誌] Asai T,他: "Effects of thyrotropin on Ref-1 mRNA and its protein levels in rat thyroid cell lines." Environmental Medicine. 40(印刷中). (1996)
• [文献書誌] Kambe F,他: "Thioredoxin-mediated redox regulation of Pax-8." Environmental Medicine. 40(印刷中). (1996)
• [文献書誌] Nagaya T,他: "Second zinc finger mutants of thyroid hormorne receptor selectively preserve DNA binding and heterodimerization but eliminate transcriptional activation." Biochem Biophys Res Commun. 222. 524-530 (1996)
• [文献書誌] Miyazaki T,他: "Molecular cloning of a novel thyroid hormone-responsive gene,ZAKI-4,in human skin fibroblasts." J Biol Chem. 271. 14567-14571 (1996)
• [文献書誌] Nomura Y,他: "Amino acid substiutions of thyroid hormone receptor β at codon 435 with resistance to thyroid hormone selectively alter homodimer formation." Endocrinology. 137. 4082-4086 (1996)
• [文献書誌] Nagaya T,他: "Heterodimerization preferences of thyroid hormone receptor α isoforms." Biochem Biophys Res Commun. 226. 426-430 (1996)
• [文献書誌] Kambe F and Seo H: "Mediation of the hormone-and serum-dependent regulation of thyroglobulin gene expression by thyroid-transcription factors in rat thyroid FRTL-5 cells." Journal of Endocrinology. 150. 287-298 (1996)
• [文献書誌] Kambe F,他: "Redox regulation of thyroid-transcription factors,Pax-8 and TTF-1,is involved in their increased DNA-binding activities by thyrotropin in rat thyroid FRTL-5 cells." Molecular Endocrinology. 10. 801-812 (1996)