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1996 年度 研究成果報告書概要

膜電位感受性色素を用いた内耳細胞の膜電位測定

研究課題

研究課題/領域番号 07457407
研究種目

基盤研究(B)

配分区分補助金
応募区分一般
研究分野 耳鼻咽喉科学
研究機関関西医科大学

研究代表者

山下 敏夫  関西医科大学, 医学部, 教授 (10077654)

研究分担者 大西 純夫  関西医科大学, 医学部, 助手 (80257914)
原田 成信  関西医科大学, 医学部, 助手 (00198920)
友田 幸一  関西医科大学, 医学部, 助教授 (50164041)
研究期間 (年度) 1995 – 1996
キーワード内耳 / らせん神経節細胞 / 膜電位感受性色素 / 膜電位測定
研究概要

1) 膜電位を光学的に観察するための測定装置のシステム化を完成させた。当初、モルモット内耳蝸牛有毛細胞を使用して色素の選択とその付加方法などについて至適条件設定に苦慮したが、有毛細胞は脱分極時にその形態を変化させることがわかり、我々の実験系に適さないことがわかった。
2) らせん神経細胞を用いて潅流による薬物刺激に対する膜電位変化をとらえることができた。しかし、Single cellレベルでは光のショットノイズに対する微小変化量の比(S/N比)が小さいため、変化をとらえることが難しかった。そこで、より安定した結果を得るために、マウスらせん神経節細胞、前庭神経節細胞の培養系を確立したところ、培養細胞の薬物刺激による応答を膜電位感受性色素を用いた膜電位測定用装置(ARGUS-50/PDA)を用いて測定することができた。
2) 我々が用いていた膜電位感受性色素は吸光色素であり、S/N比がきわめて小さいというデメリットがあり、1個の細胞の電位変化をとらえきれないことがあった。そこで、より大きなS/N比を示す蛍光色素を使用するための光学的計測装置のシステムを導入し始めており、この実験系を確立する。
3) 上記のシステムを組み合わせて、確実に細胞の膜電位変化をとらえられる実験系を確立する。また、脳スライスを用いて蝸牛神経核においての膜電位の変化の記録、マウス蝸牛のスライスの使用の試み、内耳有毛細胞群をsurface preparation法で摘出し、各細胞間の刺激に対する応答を同システムを用いて検討する計画である。

  • 研究成果

    (9件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (9件)

  • [文献書誌] 山下敏夫、朝子幹也、土井 直、松本あゆみ、楊 仕明: "膜電位感受性色素を用いた単離前庭神経節細胞の電位変化" 厚生省特定疾患 聴覚・平衡機能系疾患調査研究班前庭機能異常 平成9年度研究報告書. 68-70 (1997)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [文献書誌] A.Matsumoto,T.Doi,M.Asako,SM.Yang,T.Yamashita: "Optical Recording of membrane potential on isolated spiral ganglion cells of newborn mice using a voltage-sensitive dye." Acta Otolaryngol(Stockh). Suppl 539. 34-39 (1998)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [文献書誌] SM.Yang,T.Doi,M.Asako,A.Matsumoto,T.Yamashita: "Optical Recording of membrane potential in dissociated mouse vestibular ganglion cells using a voltage-sensitive dye." (in press).

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [文献書誌] M.Asako,T.Doi,A.Matsumoto,SM.Yang,T,Yamashita: "Spatial and temporal patterns of evoked neural activity from auditory nuclei in chick drainstem detected by optical recording." (in press).

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [文献書誌] SM.Yang,T.Doi,M.Asako,A.Matsumoto,T.Yamashita: "Multiple-site optical recording of mouse brainstem evoked by vestibulocochlear nerve stimulation." (in press).

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [文献書誌] A.Matsumoto, T.Doi, M.Asako, SM.Yang, T.Yamashita: "Optical Recording of membrane potential on isolated spiral ganglion cells of newborn mice using a voltage-sensitive dye." Acta Otolaryngol (Stockh). Suppl 539. 34-39 (1998)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
  • [文献書誌] SM.Yang, T.Doi, M.Asako, A.Matsumoto, T.Yamashita: "Optical Recording of membrane potential in dissociated mouse vestibular ganglion cells using a voltage-sensitive dye." (in press).

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
  • [文献書誌] M.Asako, T.Doi, A.Matsumoto, SM.Yang, T.Yamashita: "Spatial and temporal patterns of evoked neural activity from auditory nuclei in chick brainstem detected by optical recording." (in press).

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
  • [文献書誌] SM.Yang, T.Doi, M.Asako, A.Matsumoto, T.Yamashita: "Multiple-site optical recording of mouse brainstem evoked by vestibulocochlear nerve stimulation." (in press).

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より

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公開日: 1999-12-08  

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