Wilms腫瘍の癌抑制遺伝子産物の転写制御活性

1995 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 07457580
• 研究種目: 一般研究(B)
• 研究機関: 大阪大学
• 研究代表者: 秋山 徹 大阪大学, 微生物病研究所, 教授 (70150745)
• キーワード: 細胞周期 / WT1 / サイクリン / CDK / 転写因子 / 癌抑制遺伝子 / Wilms腫瘍 / 転写制御

研究概要

(1)WT1遺伝子産物による転写制御の機構を明らかにするために、酵母を用いたtwo-hybrid systemによりWT1蛋白質と結合する細胞蛋白質のcDNAを単離し、in vitroで結合すること、種を越えてXenopusのWT1蛋白質とも結合することを明らかにした。(2)WT1蛋白質の標的遺伝子を同定するために酵母を用いたone-hybrid systemを確立し候補遺伝子の単離を行った。(3)WT1遺伝子は、今までに知られている4種類のsplicing variantsに加えてzinc finger 2およびzinc finger 3の欠失した遺伝子産物をつくることを見いだし解析をすすめた。zinc finger 3の欠失したvariantに引き続きzinc finger 3が欠失したvariantが特異的な塩基配列に結合する活性をもつことを明らかにし、結合のconsensus配列を明らかにした。今までに知られているvariantsは細胞周期のG1-S移行を抑制する活性をもっていたが、これらのvariantsは抑制活性を示さなかった。また、これらのvariantsの発現が急性白血病で異常になっていることが見いだされた。(4)胚性細胞種F9が分化するためにはWT1蛋白質の発現が低下することが必須で低下しない場合にはアポトーシスがおきることを明らかにし、さらにこの過程はcAMPのレベルにより調節されることを明らかにした。すなわち、cAMPレベルが高いとWT1によるアポトーシスの誘導はおこらなくなることが観察された。

研究成果

• [文献書誌] T.Kudoh et al.: "G1 phase arrest induced by Wilms tumor protein WT1 is abrogated by cyclin/CDK." Proc.Natl.Acad.Sci.USA.92. 4517-4521 (1995)
• [文献書誌] I.Miyashiro et al.: "Subcellular localization of the APC protein : Immunoelectron microscopic study of the association of the APC protein with catenin." Oncogene.11. 89-96 (1995)
• [文献書誌] Y.Dobashi et al.: "Constitutive overexpression of Cdk2 inhibits neuronal differentiation of rat pheochromocytoma PC12 cells." J.Biol.Chem.270. 23031-23037 (1995)
• [文献書誌] G.-H,Baeg,et al.: "The tumor suppressor gene product APC blocks cell cycle progression from the G0/G1 to S phase." EMBOJ. 14. 5618-5625 (1995)
• [文献書誌] A.Matsumine,et al: "The MCC gene product regulates cell cycle transition from G0/G1 to S phase." J.Biol.Chem.(in press.).
• [文献書誌] T.Yamagami,et al.: "Growth inhibition of human leukemic cells by WT1 antisense oligodeoxynucleotides : implications for the involvement of WT1 in leukemogenesis." Blood.(in press.).
• [文献書誌] 秋山 徹: "癌抑制遺伝子の最前線" 横田 淳 秋山 徹, 158 (1995)
• [文献書誌] 秋山 徹: "転写のしくみと疾患" 村松 正實, 163 (1996)