ヒト脳腫瘍の実験治療系開発のためのヒト型多剤耐性遺伝子導入マウスの作成・解析

1996 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 07457588
• 研究種目: 基盤研究(B)
• 研究機関: 東海大学
• 研究代表者: 玉置 憲一 東海大学, 医学部, 教授 (50055860)
• 研究分担者: 山崎 等 東海大学, 医学部, 講師 (20191273) ; 中村 雅登 東海大学, 医学部, 講師 (00164335) ; 上山 義人 東海大学, 医学部, 助教授 (30072408)
• キーワード: 血液脳関門 / トランスジェニックマウス / 脳腫瘍 / MDR / 抗癌剤多剤耐性 / P糖蛋白質 / 膜能動輸送 / 化学療法

研究概要

膜P糖蛋白(P-Gp)の脳血管内皮細胞における発現は血液脳関門(Blood Brarrier,BBB)との関連で注目され、グリオーマの抗癌剤耐性には間質血管内皮に発現するMDR1遺伝子/P-GpによるBBB様機能が密接に関与していると考えている。本研究では、エンドセリンプロモーターで発現誘導したヒトMDR1遺伝子をマウス(wild type,BALB/c)に遺伝子導入し、マウス毛細血管にヒトMDR1遺伝子を発現させたトランスジェニックマウスを作出、SCID/nudeマウス化したヒトMDR1トランスジェニックSCID/ヌードマウス(MDR1-SCID,MDR1-nu)にヒトグリオーマXenograftを皮下移植し、抗癌剤に対するin vivo抗癌剤感受性を評価し、ヒトグリオーマ抗癌剤耐性に対するP-Gpの関与を客観的かつ能動的に明らかにする。
本年度の研究では、まずマウスエンドセリンプロモーターにヒトMDR1遺伝子cDNA分子(mEND-MDR1)を作成した。このmEND-MDR1をトランスジーンとして胚細胞操作によりBALB/cマウスに遺伝子導入しトランスジェニック(MDR1-Tgマウス)を作出した。マウス皮下結合組織毛細血管におけるヒト型MDR1遺伝子P-Gpを発現、産生をRT-PCR法および免疫組織化学的手法により確認した。現在、MDR1-TgマウスをSCIDマウスを交配することにより、MDR1-TgSCIDマウスの作出を続行している。

研究成果

• [文献書誌] Yoshiyuki Abe,Hitoshi Yamazaki Norikazu Tamaoki et al: "“Advantage of in vivo chemosensitivity assay to detect vincristine resistance in a human epidermoid carcinoma xenograft"" Anticancer Research. 16. 729-734 (1996)
• [文献書誌] Yoshiyuki Abe,Yasyuki Ohnishi Norikazu Tamaoki et al: "“P-glycoprotein-mediated acquired multidrug resistance of human lung cacncer cells in vivo"" British Journal of Cancer. 74. 1929-1934 (1996)
• [文献書誌] Masato Nakamura,Yoshiro Oshika Norikazu Tamaoki,et al: "“Gene expresstion of granulocyte colony-stimulating factor (G-CSF) in non-small cell lung cancer"" Anticancer Research. 17(in press). (1997)
• [文献書誌] Yoshiyuki Abe,Yasyuki Ohnishi Norikazu Tamaoki et al: "“A xenograft line of human teratocarcinoma established by serial transplantation in severe combined immunodeficient (SCID) mice"" APMIS. 105(in press). (1997)
• [文献書誌] Yukihito Takamiya,Yoshiyuki Abe,Norikazu Tamaoki et al: "“Murine P-glycoprotein on stromal vessels mediates multidrug resistance in intracerebral human glioma xenografts"" British Journal of Cancer. (in press). (1997)