神経細胞分化を制御する遺伝子群のカタログ化と機能解析

1995 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 07458210
• 研究種目: 一般研究(B)
• 研究機関: 国立精神・神経センター
• 研究代表者: 桃井 隆 国立精神神経センター, 神経研究所・5部, 室長 (40143507)
• 研究分担者: 浦瀬 香子 国立精神神経センター, 神経研究所・5部, 研究員 ; 柚木崎 美千子 国立精神神経センター, 神経研究所・5部, 研究員 ; 藤田 恵理子 国立精神神経センター, 神経研究所・5部, 研究員
• キーワード: P19EC / レチノイン酸 / B-HLH / 神経細胞死 / 神経細胞分化 / Fas / CPP-32

研究概要

P19EC細胞はレチノイン酸により神経細胞へと分化する。0.5uMレチノイン酸で48時間処理すると神経細胞分化を制御する転写因子であるB-HLHモチーフをもつMASH、NSCLなどの発現が観察された。また、レチノイン酸処理した細胞は神経細胞前駆体である神経上皮細胞のマーカーであるネスチン陽性であった。この分化段階特異的cDNAライブラリーを作成し、このに特異的に発現する遺伝子約100個を解析した。その結果既知の遺伝子としてオリゴ糖転移酵素遺伝子、MK遺伝子、など約40個と未知の遺伝子約60個を得ることができた。MKおよびオリゴ糖転移酵素遺伝子の発現はレチノイン酸により濃度依存的に増加することをノーザン法により解析した。また、神経細胞分化の段階でDNAラダーが見られ、神経細胞死に関与するCPP-32の活性がレチノイン酸により誘導されことが明らかとなった。CPP-32のmRNAの発現は増大しないことから、CPP-32を活性化する因子の発現を調べたところ、神経細胞分化の過程でFas、FasリガンドのmRNA発現がレチノイン酸により誘導されることが明らかとなった。また、細胞凝集によりCPP-32の活性は増大することから、細胞凝集による何らかの情報がCPP-32の活性化に関与していることが示唆された。

研究成果

• [文献書誌] Yokota, C.: "Activin induces the expression of the Xenopus homologue of sonic hedgehog during mesoderm formation in Xenopus explants." Biohcem. Biophys. Commun. 207. 1-7 (1995)
• [文献書誌] Tsukahara, T.: "Regulation of alternative splicing in the amyloid precursor protein(APP)mRNA during neuronal and glial differentiation of P19 embryonal carcinoma cells." Brain Ress.679,. 178-183 (1995)
• [文献書誌] Yamagata, T.: "Hepatocytes growth factor that specifically expressed in microglia activates ras in neuronal cells, similar to the action of neurotrophic factors." Biohcem. Biophys. Commun.210,. 231-237 (1995)
• [文献書誌] Odaka, A.: "c-jun inhibited the neuron-specific amyloid precursor protien, but stimulated the non-neuron type one in P19 EC cells." Biochem. Biophys. Res Commun.206. 821-828 (1995)