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1996 年度 実績報告書

シナプス伝達に関わる機能分子とセカンドメセンジャーの細胞動態の画像化と定量化

研究課題

研究課題/領域番号 07508004
研究機関東京大学

研究代表者

御子柴 克彦  東京大学, 医科学研究所, 教授 (30051840)

研究分担者 道川 貴章  東京大学, 医科学研究所, 助手 (90282516)
古市 貞一  東京大学, 医科学研究所, 助教授 (50219094)
キーワード神経伝達物質 / 神経伝達 / イノシトールポリリン酸 / シナプス / シナプトタグミン / シナプス小胞
研究概要

シナプトタグミンはシナプス小胞膜上に存在し、神経伝達物質放出調節に関与する蛋白質である。我々は、このシナプトタグミンにイノシトールポリリン酸が結合し、これによって、神経伝達物質放出が抑制されることを見出し、イノシトールポリリン酸/シナプトタグミンの神経伝達物質放出機構における新しい可能性を報告してきた。
我々は、このシナプトタグミンを介したイノシトールポリリン酸による神経伝達の阻害機構を分子レベルで明らかにする目的で、シナプトタグミンに結合し、イノシトールポリリン酸でその結合が阻害される蛋白質の存在を想定し、その精製を試みた。
マウスシナプトタグミンIIのイノシトールポリリン酸結合領域を含む部分をGSTとの融合蛋白質(GST-SytIIC2AB)として発現、精製し、この融合蛋白質に特異的に結合する蛋白質(SBPs)をマウス全脳の粗抽出液中から、glutathion SepharoseでGST-SytIIC2ABと共沈させた。このSBPs/GST-SytIIC2AB/glutathion Sepharoseから100μMIP6で溶出した画分中には複数種の蛋白質が存在し、その中にはclathrin assembly complex(AP2)の他、66kDa,80kDaのそれぞれ新規な蛋白質が含まれていることがSDS-PAGE,Westem blotting,部分アミノ酸配列解析から判明した。

  • 研究成果

    (6件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (6件)

  • [文献書誌] Matsumoto,Mineo et al.: "Ataxia and epileptic seizures in mice lacking type 1 inositol 1,4,5-trisphosphate receptor" Nature. 379. 168-171 (1996)

  • [文献書誌] Fukuda,Mitsunori et al.: "Structure-function relationships of the mouse Gap1^m(Determination of the inositol 1,3,4,5-tetrakisphosphate-binding domain)" J.Biol.Chem.271. 18838-18842 (1996)

  • [文献書誌] Inoue,Yoshiro et al.: "Cell death of oligodendrocytes or demyelination induced by overexpression of proteolipid protein depending on expressed gene dosage" Neuroscience Research. 25. 161-172 (1996)

  • [文献書誌] Yamaguchi,Yoshihide: "Myelin proteolipid protein(PLP),but not DM-20,is an inositol hexakisphosphate-binding protein" J.Biol.Chem.271. 27838-27846 (1996)

  • [文献書誌] Fukuda,Mitsunori: "Mutation of the pleckstrin homology domain of Bruton's tyrosine kinase in immunodeficiency impaired inositol 1,3,4,5-tetrakisphosphate binding capasity" J.Biol.Chem.271. 30303-30306 (1996)

  • [文献書誌] Ohara-Imaizumi,Mika: "Distinct roles of C2A and C2B domains of synaptotagmin in the regulation of exocytosis in adrenal chromaffin cells" Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 94. 287-291 (1997)

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公開日: 1999-03-08   更新日: 2016-04-21  

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