1995 年度実績報告書

遺伝子導入マウスを用いた組織別突然変異の鋭敏簡便な検出とDNA変化の解析

研究課題

研究課題/領域番号	07554043
研究種目	試験研究(B)
研究機関	東海大学
研究代表者	権藤洋一東海大学, 総合医学研究所, 助教授 (40225678)
研究分担者	中津可道大阪大学, 細胞生物部, 助手 (00207820) 丹羽太貫広島大学, 原爆放射能医学部, 教授 (80093293) 祖父尼俊雄国立衛生試験所, 安全性生物試験センター・変異遺伝部, 部長 (20132889) 横山峯介三菱化学生命科学研, 生殖工学開発, 室長中村健司九州大学, 生体防衛医学部, 助手 (90253533)
キーワード	トランスジェニックマウス / 突然変異検定 / 環境変異原 / 発がんリスク評価 / 分子遺伝学 / マウス / rpsL遺伝子 / シャトルベクター
研究概要	本研究では、体細胞突然変異を迅速かつ簡便に検出できるシャトルベクターを導入した本邦独自のトランスジェニックマウスを開発し、自然発生突然変異や環境変異原のもつ遺伝毒性を、生きたマウス個体の発生段階別、各臓器別に、極めて高感度に検定できる系を確立する。平成7年度は、まず権藤が基本検定系を確立し論文発表した。横山、中村はマウス供給に必要な凍結卵による系統保存法を確立し利用している。権藤、真木は新しいシャトルベクターと宿主大腸菌系を作成した。真木は、大腸菌系におけるモニター遺伝子そのものの突然変異をさまざまな系で解析した。丹羽は放射線投与したマウスにおける生殖細胞およびその子孫への影響を調べた。祖父尼は他のトランスジェニックマウスを用いてDNAなどの変異原の影響を小核試験とも併せて解析し、本研究との比較を行なった。中津、美野輪はそれぞれXPA遺伝子欠損マウスおよびAPC遺伝子欠損マウスとの交配を進行中であり、中津はすでに突然変異解析に着手した。偶然ながら、XPA遺伝子欠損マウスとの交配からHITECマウスの1系統が、XPA遺伝子座と極めて強く連鎖し第4染色体に位置することもわかった(権藤、中津)。権藤はFISHを用いてシャトルベクターが実際にゲノムの一箇所に導入されていることを確認した。さらに権藤はMNU、AFB1、Trp-P-2などで誘発される突然変異を解析し、MNU誘発突然変異に関してはその塩基配列変化も解析を始めた。若林はMeIQおよびAzoxymethane誘発突然変異を、特に発がんの標的臓器として知られている肝臓、大腸を中心に解析した。平成7年10月にワークショップを兼ねて班会議を行ない、班員に加え本解析系に関わる研究者を交えて情報交換と研究打ち合わせを行なった。平成8年3月には米国環境変異原学会の分科会において本研究系について招待講演を行なう。

研究成果
(7件)

すべてその他

すべて文献書誌 (7件)

[文献書誌] Y. Gondo, et al.: "A novel positive detection system of in vivo mutations in rpsL (StrA) transgenic mice." Mutation Res.(in press). (1996)
[文献書誌] H. Yamaguchi, et al. (K. Nakamura): "Dopamine D2 receptor plays a critical role in cell proliferation and pnopiomelanocortin expression in the pituitary." Genes to Cell. (in press). (1996)
[文献書誌] Y. Tokita, et al. (K. Nakamura): "Characterization of exciatory amino and acid neurotoxicity in N-methyl-D-aspartate receptor-deficient mouse cortieal neuroxil cells." Eur J. Neurasci.(in press). (1996)
[文献書誌] M. Masa, et al. (K. Nakamura): "Specific deficit of the ON response in visual transmission by targeted disruption of the m G1&R6 gene." Cell. 80. 757-765 (1995)
[文献書誌] Y-J. Fan, et al (O. Niwa): "Dose response of radiation indaction of germline mutation at a hypervariable mouse minisatellite locas." Int. J. Radiat. Biol. 68(2). 177-183 (1995)
[文献書誌] O. Nira, et al: "Association of minisatellite sequence instability with c-myc gene amplification and K-ras gene mutation in methy lehatanrluane-induced mouse sareanas." Cancer Res.55(23). 5670-5676 (1995)
[文献書誌] 権藤洋一他: "「抗変異原・抗発がん物質とその検索法」11. 4 DNA変異を検出する方法" 講談社サイエンティフィク, 11 (1995)

1995 年度 実績報告書

遺伝子導入マウスを用いた組織別突然変異の鋭敏簡便な検出とDNA変化の解析

研究代表者

権藤 洋一 東海大学, 総合医学研究所, 助教授 (40225678)

研究成果

[文献書誌] Y. Gondo, et al.: "A novel positive detection system of in vivo mutations in rpsL (StrA) transgenic mice." Mutation Res.(in press). (1996)

[文献書誌] H. Yamaguchi, et al. (K. Nakamura): "Dopamine D2 receptor plays a critical role in cell proliferation and pnopiomelanocortin expression in the pituitary." Genes to Cell. (in press). (1996)

[文献書誌] Y. Tokita, et al. (K. Nakamura): "Characterization of exciatory amino and acid neurotoxicity in N-methyl-D-aspartate receptor-deficient mouse cortieal neuroxil cells." Eur J. Neurasci.(in press). (1996)

[文献書誌] M. Masa, et al. (K. Nakamura): "Specific deficit of the ON response in visual transmission by targeted disruption of the m G1&R6 gene." Cell. 80. 757-765 (1995)

[文献書誌] Y-J. Fan, et al (O. Niwa): "Dose response of radiation indaction of germline mutation at a hypervariable mouse minisatellite locas." Int. J. Radiat. Biol. 68(2). 177-183 (1995)

[文献書誌] O. Nira, et al: "Association of minisatellite sequence instability with c-myc gene amplification and K-ras gene mutation in methy lehatanrluane-induced mouse sareanas." Cancer Res.55(23). 5670-5676 (1995)

[文献書誌] 権藤洋一他: "「抗変異原・抗発がん物質とその検索法」11. 4 DNA変異を検出する方法" 講談社サイエンティフィク, 11 (1995)

1995 年度実績報告書

権藤洋一東海大学, 総合医学研究所, 助教授 (40225678)