| 研究課題/領域番号 |
07554043
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| 研究種目 |
基盤研究(A)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 展開研究 |
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| 研究分野 |
遺伝
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| 研究機関 | 東海大学 |
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研究代表者 |
権藤 洋一 東海大学, 総合医学研究所, 助教授 (40225678)
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| 研究分担者 |
美野輪 治 (財)癌研究会癌研究所, 細胞生物部, 研究員 (00181967)
中津 可道 大阪大学, 細胞生体工学センター, 助手 (00207820)
丹羽 太貫 京都大学, 放物線生物研究センター, 教授 (80093293)
真木 寿治 奈良先端科学技術大学院大学, バイオサイエンス研究所, 教授 (20199649)
祖父尼 俊雄 国立医薬品食品衛生研究所, 変異遺伝部, 部長(研究職) (20132889)
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| 研究期間 (年度) |
1995 – 1997
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| キーワード | トランスジェニックマウス / 突然変異 / rpsL / 発がんリスク評価 / 遺伝毒性検定 / 環境変異原 / 変異原性試験 / シャトルベクター |
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| 研究概要 |
突然変異をポジティブに検出できる大腸菌rpsL遺伝子を導入したマウスを開発し、自然発生突然変異や環境変異原のもつ遺伝毒性を、鋭敏かつ簡便に検定できる系を確立した。権藤は、pML4導入マウスに加え、新しくpSSW導入マウスも確立した。これにより1)バックグランド突然変異体頻度が1×10^<-5>に下がる、2)検定効率が約3倍になる、3)メチル化されたシャトルベクターも効率よく検定できる、4)生じる塩基変化はいずれの系とも同じである、ということが明らかになった(権藤、中村、若林)。変異原としてはMNU、MeIQx、AOM、AFB1、Trp-P-2に加え、葉緑素成分であるクロロフィリンや茶成分であるEGCGの抗変異原性も検討した(権藤、若林)。真木は、大腸菌系において種々のmutator変異の影響と、モニター遺伝子そのものの配列によるホットスポットとの相関を明らかにした。祖父尼はMutaMouse、BigBlue系にくわえ、gpt遺伝子、cII遺伝子を利用したポジティブ選択系も開発し、Tgマウスを用いた変異解析系前半の比較検討も行った。丹羽はマウスミニサテライトに加えDroshphilaのwhite遺伝子座においても放射線投与の非投与ゲノムに対する遅延効果を確認した。中津および美野輪は、pML4やpSSW導入マウスと、XPA欠損マウスおよびMLH1遺伝子欠損マウスとの交配を行いF2マウスが得て解析中である。さらに、rpsLトランジェニックマウスを用いたDNA変化の解析の結果、生物個体に遺伝毒性がもたらされているときには塩基置換が、細胞毒性がもたらされているときには1塩基欠失によるフレームシフト突然変異がモニター遺伝子であるrpsL上に現われることが示唆され、今後、薬剤の発がん性と抗がん性を検証する場合、有効な指標となる可能性が示された。
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