猫用の多価リコンビナントウイルス生ワクチンの開発

1996 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 07556069
• 応募区分: 試験
• 研究機関: 東京大学
• 研究代表者: 見上 彪 東京大学, 大学院・農学生命科学研究科, 教授 (20091506)
• 研究分担者: 遠矢 幸伸 鹿児島大学, 農学部, 助教授 (30021702) ; 望月 雅美 共立商事(株), 臨床微生物研究所, 所長(研究職) (90157834) ; 時吉 幸男 化学及血清療法研究所, 研究開発部, 室長(研究職) ; 藤川 勇治 共立商事(株), 中央研究所, 副所長(研究職) ; 大塚 治城 東京大学, 大学院・農学生命科学研究科, 教授 (80261957)
• キーワード: FHV-1 / TK / FCV / カプシド蛋白 / 間接蛍光抗体法 / イムノプロット解析 / ウイルス性鼻気管炎 / 組換え多価ワクチン

研究概要

本研究の目的は特に猫のウイルス感染症に対して安全性、経済性、有効性全てに優れる多価リコンビナントウイルス生ワクチンを開発、実用化することである。本年度は以下のような成績を得た。
1.FCVのカプシド蛋白をコードする遺伝子をFHV-1のTK遺伝子欠損部位に挿入した組換えウイルスC7301dlTK-Capを作出した。間接蛍光抗体法及びイムノブロット解析により本組換えウイルスはFCVに対する免疫原を発現していることが確認された。さらにC7301dlTK-CapをSPF猫に強制感染させた結果、FCVに対する中和抗体が誘導された。
2.約12週齢のPSF猫15匹を、ワクチンとしてC7301dlTK-CapもしくはC7301dlTKを接種する群とワクチン末接種群の計3群に分け、感染実験をおこなった。ワクチンウイルスは眼窩内、鼻内及び口内に3週間間隔で2回接種し、その後4週間目にFCV強毒F4株を、続いて8週間目にFHV-1強毒C7301株を用いて同じ感染経路より攻撃した。その結果、FCV攻撃後C7301dlTK接種群及びワクチン末接種群の猫は口内炎や鼻端部潰瘍を含む典型的なFCV感染の症状を呈したのに対して、C7301dlTK-Cap接種群の猫は2匹において口腔内に軽度のびらんもしくは発赤をそれぞれ観察したのみであった。さらにFHV-1を攻撃した結果、ワクチン末接種群の猫はすべて発熱や結膜炎を伴う典型的なウイルス性鼻気管炎(FVR)の症状を呈したのに対して、C7301dlTK-cap接種群及びC7301dlTK接種群の猫は軽度なくしゃみや流涙を数匹の検体で観察したのみであった。以上の結果より、C7301dlTK-CapはFCV及びFHV-1両感染症を有意に防御できることが明らかになった。
これらの成果は、ヘルペスウイルスをベクターに用いた組換え多価ワクチンの開発に有用な知見を与えると思われる。

研究成果

• [文献書誌] Yokohama,N.,et.el.: "Pathogenicity and vaccine efficacy of a thymidine kinase-deficient mutant of feline herpesvirus type 1 in cats." Archives of Virology. 141. 481-494 (1996)
• [文献書誌] Yokoyama,N.,et.al.: "Vaccine efficacy of recombinant feline herpesvirus type 1 expressing immunogenic proteins of feline calicivirus in cats." Archives of Virology. 141(12). 2339-2351 (1996)
• [文献書誌] Maeda,K.,et.al.: "Expression and properties of feline herpesvirus type 1 gD(hemagglutinin)by a recombinant baculovirus." Virus Research. (In press). (1997)
• [文献書誌] Maeda,K.,et.al.: "Adhesion of insect cells expressing the feline herpesviurs type 1 hemagglutinin(gD)to feline cell lines." Journal of Veterinary Medical Science. 59(3)(In press). (1997)
• [文献書誌] Yokoyama,N.,et.al.: "Recombinant feline herpesvirus type 1 expressing immunogenic proteins inducible virus nertralizing antibody against feline calcivirus in cats." Vaccine. (In press). (1997)
• [文献書誌] Yokoyama,N.,et.al.: "Recombinant viral vector vaccines for veterinary use.Review article." Journal of Veterinary Medical Science. (In press). (1997)