研究課題/領域番号 |
07556094
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研究機関 | 九州大学 |
研究代表者 |
緒方 靖哉 九州大学, 農学部, 教授 (20038277)
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研究分担者 |
田中 治 農林水産省草地試験場, 研究員
大桃 定洋 農林水産省畜産試験場, 研究員
土居 克美 九州大学, 農学部, 講師 (40253520)
増田 泰久 九州大学, 農学部, 教授 (60038263)
藤尾 雄策 九州大学, 農学部, 教授 (90038224)
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キーワード | サイレ-ジ / 乳酸菌生剤 / 高機能性乳酸菌 / ファージ耐性プラスミド / 硝酸分解性菌 / 組換え体 / 育種 / 実用化 |
研究概要 |
西南暖地型気候に適応したサイレ-ジ乳酸稈菌(乳酸菌生剤)の開発を目的として、西日本及び沖縄地方から高湿耐性・高乳酸発酵性NGRI株80株を分離し、これらの高機能化と実用化を目指して下記の成果を得た。 (1)分離菌株の種名を決定し、L.plantarum、L.pentosus、L.casei、L.rhamnosusに属することを明らかにした。Phosphofructokinase(PFK)遺伝子の保存領域もこれら菌種間の同定に有意であった。 (2)L.plntarum NGRI0101 株の保持するファージ耐性プラスミドpLKS(2.1kbp)のori配列やrep遺伝子等の構造と機能を明らかにし、さらにpLKSの複製様式及びpLKSの有するファージ耐性がrep機能間の拮抗に起因する機構を推定した。 (3)サイレ-ジ発酵におけるファージ汚染の防除対策の一方法として、プラスミドpLKS及びそのファージ耐性遺伝子の利用の有効性を示した。さらに、pLKSと大腸菌のpUC119ベクターを連結した組換えプラスミドpUCLSEmは大腸菌、乳酸菌の両方で複製が可能であることにより、乳酸菌-大腸菌間のシャトルベクターでかつファージ耐性を有したベクターになることを示した。 (4)牧草由来のサイレ-ジ中の過剰NO_3^-態窒素をサイレ-ジ発酵過程で微生物的に低減化することを目的とし、硝酸還元性菌Bacillus licheniformis No.16を分離した。その性質とNO_3^-態窒素分解能に優れていることを示した。また、本菌株の硝酸還元酵素オペロンnarHのクローニングを行った。
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