免疫応答を制御する転写因子の改変による疾患モデルマウスの作製とその解析

1997 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 07557024
• 研究機関: 東京大学
• 研究代表者: 新井 賢一 東京大学, 医科学研究所, 教授 (00012782)
• 研究分担者: 井上 達 国立衛生試験所, 毒性部, 部長(研究職) (50100110) ; 中畑 龍俊 東京大学, 医科学研究所, 教授 (20110744) ; 正井 久雄 東京大学, 医科学研究所, 助教授 (40229349) ; 渡辺 すみ子 東京大学, 医科学研究所, 助手 (60240735) ; 横田 崇 東京大学, 医科学研究所, 客員教授 (50134622)
• キーワード: JAK / STAT / NF-AT / シグナル伝達 / GM-CSF受容体 / T細胞サブセット / 免疫応答

研究概要

GM-CSF受容体の発現と血球系細胞の分化との関係について検討する目的で、hGM-CSF受容体Tgマウスを用いて解析を行い、hGM-CSFがin vitro及びin vivoにおいて骨髄球系、巨核球系、赤血球系を含む様々な血球系細胞の増殖及び分化を支持することを示した。hGM-CSFは、リンパ球系細胞の分化にも影響を及ぼしており、特に胸腺細胞については、hGM-CSFにより分化が抑制されること、そしてこれはおそらくDNからDPへの移行の阻害が原因であることが判明した。また、IL-4のシグナル伝達に必要とされるSTAT6をエストロゲン受容体と融合させ、b-estradiol analog 4-Hydroxy-tamoxifenに反応して活性化するconditionally active formの分子を作製した。このようなconditional systemは、サイトカインによつて誘導される免疫応答及びTh1/Th2タイプのサイトカイン産生の制御に有用であることが期待される。
NFATの解析については、マウスNFATxのN末領域のカルシニューリンとの結合に関与する領域及び転写活性化に関与する領域を同定し、その結果をもとに、dominant negative変異体を作成した。この変異体は、人為的なサイトカイン産生パターンの制御に道を開く可能性が考えられる。さらに、ヒトT細胞分化におけるNFATの制御についても解析を行い、NFATx,c,pの発現がdifferentialな制御を受けていること、特にCD4^+CD8^+DP細胞において発現レベルの高いNFATxは、DP細胞におけるNFAT-DNA結合複合体の主要構成因子となっていることを示した。この結果は、DP細胞においてNFATxが重要な役割を果している可能性を示唆している。

研究成果

• [文献書誌] Itoh,T.et al: "Definition of the role of tyrosin residues of the common β subunit regulating multiple signaling pathways of GM-CSF recepter." Mol.Cell.Biol.18・3. 742-752 (1998)
• [文献書誌] Masuda,E.S.et al: "Control of NFATxl nuclear translocation by a calcineurin-regulated inhibitory comain." Mol.Cell.Biol.17・4. 2066-2075 (1997)
• [文献書誌] Pan,S.et al: "Molecular cloning and functional characterization of murine cDNA encloning transcription factor NFATc." Biochem.Biophys.Res.Communi.240・2. 314-323 (1997)
• [文献書誌] Yasuda,Y.et al: "Human granulocyto-macrophage colony-stimulating factor (hGM-CSF) induces inhibition of intrathymic T-cell development in hGM-CSF receptor transgenic mice." Blood. 89. 1349-1356 (1997)
• [文献書誌] Nishijima,I.et al: "Hematopoietic and lymphopoietic responses in hGM-CSF receptor transgenic mice injected with hGM-CSF." Blood.90. 1031-1038 (1997)
• [文献書誌] Watanabe,S.et al: "Characterization of cis-acting sequences and trans-acting signals regulating early growth response 1 (egr-1) and c-fos promoters through GM-CSF in BA/F3 cells." Blood. 89. 1197-1206 (1997)