遺伝子治療のためのEBウイルスベクターに関する研究

1996 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 07557029
• 研究機関: 北海道大学
• 研究代表者: 高田 賢蔵 北海道大学, 医学部, 教授 (30133721)
• 研究分担者: 秋田谷 龍雄 日立化成工業株式会社, 医薬品研究所, 研究員 ; 杉浦 亮 北海道大学, 医学部, 助手 (20241317)
• キーワード: EBウイルス / ウイルススペクター / 遺伝子治療

研究概要

1.発癌活性の無いEBV産生システムの開発
EBVの発癌遺伝子LMP1を欠失したEBV作製を試みているが、現在まで成功していない。EBVのB95-8株のDNAを用いて相同組み替え用のプラスミドを作製しているが、Akata EBVとB95-8EBVで塩基配列に違いがある可能性を考え、Akata EBVのLMP1領域の全塩基配列を決定し、同時にAkata EBV由来のプラスミドを調整し、組み替えEBVの作製を試みている。
2.増殖性を無くしたEBV産生システムの開発
EBVの増殖に必須なBALF2遺伝子を欠失したEBV作製を試みているが、現在まで成功していない。相同組み替え用プラスミドののりしろ部分を大きくしたプラスミドを作製し、さらに実験を行っている。BALF2遺伝子を発現するパッケージング細胞は既に作製した。
3.アンプリコン系の開発
200kbを越えるEBV DNAはウイルス粒子にパッケージングされないことを利用し、巨大ゲノムEBV感染細胞を作製し、この細胞をパッケージング細胞として、EBVの複製起点とパッケージングシグナルをもつプラスミド(これをアンプリコンDNAと呼ぶ)をウイルス粒子として産生するシステム開発を行っている。

研究成果

• [文献書誌] Shimizu, N.: "Colonal propagation of Epstein-Barr virus (EBV) recombinants in EBV-negative Akata Cells" J. Virol.70. 7260-7263 (1996)
• [文献書誌] Wen, S.: "Association of Epstein-Barr virus (EBV) with sjogren's syndrome : differential EBV expression between epithelilal cells and lymphocytes in salivary glands" Am. J. Pathol.149. 1511-1517 (1996)
• [文献書誌] Yoshiyama, H.: "Epstein-Barr virus infection to human gastric carcinoma cells : implication of the existence of anew virus receptor different from CD21" J. Virol. (印刷中).
• [文献書誌] Koide, J.: "Spontaneous establishment of an Epstein-Barr vitus-infected fibroblast line from the synovial tissue of a rheumatoid arthritis patient" J. Virol. 71. 2478-2481 (1997)
• [文献書誌] Yanai, H.: "Clinical morphology of Epstein-Barr virus-associated gastric carcinoma" Gastrointest. Endosco.印刷中.
• [文献書誌] Wen. S.: "Epstein-Barr virus (EBV) infection in salivary gland tumors : lytic EBV infection in nonmalignant epithelial cells surrounded by EBV-positive T-lymphoma cells" Virology. 227. 484-487 (1997)