I形アレルギー効果相の特異的制御

1995 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 07557033
• 研究種目: 試験研究(B)
• 研究機関: 順天堂大学
• 研究代表者: 羅 智靖 順天堂大学, 医学部, 講師 (60230851)
• 研究分担者: 八木 慎太郎 東燃, 総合研究所, 研究員 ; 内藤 幸嗣 ミドリ十字, 中央研究所, 研究員 ; 高井 敏朗 アサヒビール, 中央研究所, 研究員
• キーワード: 高親和性IgEレセプター(FcεRI) / IgE / マスト細胞 / アレルギー / 抗FcεRI抗体 / IgE結合阻害 / ヒト型化抗体

研究概要

1.抗原特異的IgEを持続的に産生するマウスモデルの作製
抗DNP IgE産生ハイブリドーマを同系マウスの皮下に移植し、抗DNP IgE抗体を持続的に産生するマウス(数10ng〜数μg/ml)を得た。ハイブリドーマ移植後10〜14日後に血清IgEはプラトーに達し、およそ6〜8週は実験に耐える。
2.アレルギー反応の反復惹起とsolubleαによるその抑制
上記マウスの耳介皮膚に抗原を塗布すると、IgE特異的に耳介に腫脹を伴った皮膚炎繰り返し惹起できることを確認した。このマウスにリコンビナント可溶化FcεRIの鎖(solubleα)を投与(静注)しておくと、抗原の反復投与による繰り返す皮膚炎を阻止できることが明らかになった。さらに、抗原を点眼することによってこのマウスにアレルギー性結膜炎を惹起できるが、solubleαの点眼は、反復するアレルギー性結膜炎を抑制できた。さらに胃ゾンデを用いて抗原を十二指腸に投与すると、このマウスは下痢を来すが、それに加えて呼吸切迫、血圧低下などのアナフィラキシ-ショック症状を呈する。IgE特異的に消化管症状を始めて惹起できるモデルが確立したことになる。このマウスにsolubleαを静脈内投与しておくと、消化管症状、アナフィラキシ-ともに回避できることを証明した。
3.抗ヒトFcεRIα鎖抗体のエピトープ解析とCDRの遺伝子クローニング
マウス抗ヒトFcεRIα鎖モノクローン抗体を複数確立したが、この抗体はIgEと競合するグループと競合しないグループに分けられる。前者のエピトープはC末側の免疫グロブリン相同ドメインに存在し、後者のエピトープはN末側のドメインに存在することを確認した。IgEと競合する抗体をヒト型化するため、そのCDR (1〜3)の遺伝子クローニングを完了し、ヒト型フレームへのグラフティングのための遺伝子構築を行なった。

研究成果

• [文献書誌] N. Terada,: "IL-4 upregulatesFc ε RI α-chain messenger RNA in eosinophils." J. Aller. Clin. Immunol.,. 96. 1161-1169 (1995)
• [文献書誌] K. Saito,: "Physical association of Fc receptor γ chain homodimer with IgA receptor" J. Aller. Clin. Immunol.,. 96. 1152-1160 (1995)
• [文献書誌] K. Naito,: "Soluble from of the human high affinity receptor for IgE inhibits recurrent allergic reaction in a novel mouse model of type I allergy." Eur. J. Immunol.,. 25. 1631-1637 (1995)
• [文献書誌] H. Seko,: "Development of tryptase-positive KU812 cellscultured in the presence of Steel factor." Int. Arch. Aller. Immunol.,. 107. 330-332 (1995)
• [文献書誌] R. U. Pawankar,: "IL-13 expression in the nasal mucosa of perennial allergic rhinirics." Amer. J. Resp. Crit. Care med.,. 152. 2059-2067 (1995)
• [文献書誌] R. U. Pawankar,: "Lymphocyte subsets of the nasal mucosa in perennial allergic rhinitis." Amer. J. Resp. Crit. Care Med.,. 152. 2049-2058 (1995)
• [文献書誌] Y. Tanaka,: "High affinity IgE receptor (Fc ε RI) expression on eosinophils infiltrating the lesions and mire-patch tested sites in atopic dermatitis." Arch. Dermatol. Res.,. 287. 712-717 (1995)
• [文献書誌] M. Takenaka,: "High affinity IgE receptor-mediated prostaglandin E2 production by monocytes in atopic dermatitis." Int. Arch. Allergy Immunol.,. 108. 247-253 (1995)
• [文献書誌] S. Noda,: "Do structural changes of T cell receptor complex occur in tumor-bearing state?" Jpn. J. Cancer Res.86. 383-394 (1995)
• [文献書誌] M. Yasuda,: "Expression and function of fibronectin binding integrins on rat mast cells." Int, Immunol.,. 7. 251-258 (1995)
• [文献書誌] A. Shibaki,: "Differential recponsiveness of langerhans cell subsets of varying phenotypic states innormal human epidermis." J. Invest. Dermatol.,. 104. 42-46 (1995)