研究課題/領域番号 |
07557071
|
研究種目 |
試験研究(B)
|
研究機関 | 東京大学 |
研究代表者 |
石橋 俊 東京大学, 医学部(病), 助手 (90212919)
|
研究分担者 |
大須賀 淳一 東京大学, 医学部(病), 医員
原田 賢治 東京大学, 医学部(病), 医員
山田 信博 東京大学, 医学部(病), 助教授 (40200729)
|
キーワード | 遺伝子治療 / Bcl2 / 肝幹細胞 / アデノウイルス / コレステロール 7α-ヒドロキシラーゼ / ノックアウトマウス / アシアロ糖蛋白受容体 |
研究概要 |
肝幹細胞の樹立のための基礎検討:129/Sv純系マウスのコロニーを樹立した。肝細胞を不死化するための手段のひとつとして、Bcl2の発現ベクターを構築し、CHO細胞に対してトランスフェクションを行い、Bcl2の発現を確認した。これに対して、たとえば、アポートシス誘導物しつである酸化脂質を作用させ、その効果がBcl2の発現によって相殺されることを確認した。これを用いて、導入新生児からコラゲナーゼを用いて肝実質細胞を採取し、in vitroで検討する。初代肝細胞培養は通常の培養設備を用い、分裂能を調べ、繼代培養の可能性について検討する。一方、各種遺伝子を肝臓において発現させる方法として、現在最も有力視されているアデノウイルスの方法を検討するため、種々の組み換えアデノウイルスを作製して目下検討している。現時点では、Bcl2発現ウイルスの肝再生に対する作用について検討中である。肝細胞分化の指標としてのコレステロール 7α-ヒドロキシラーゼの有用性について検討:コレステロール 7α-ヒドロキシラーゼの発現ベクターを構築し、CHO細胞に対してトランスフェクションを行っている。アシアロ糖蛋白受容体を利用した被移植肝のみを選択的に破壊と移植肝の再構築については、まず、アシアロ糖蛋白としアシアロソムコウドまたはそのアナログであるガラクトシル-ポリリジンにライシンかチミヂンキナーゼ遺伝子の発現ベクターを直接結合させる方法を検討中である。
|