発生工学的手法を用いたヒト造血幹細胞増殖系の確立

1995 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 07557077
• 研究種目: 試験研究(B)
• 研究機関: 筑波大学
• 研究代表者: 中内 啓光 筑波大学, 基礎医学系, 教授 (40175485)
• 研究分担者: 今井 裕 農林水産省, 畜産試験場・繁殖部・細胞操作研究室, 室長 ; 徳元 康人 筑波大学, 基礎医学系, 助手 (70261170) ; 中村 幸夫 筑波大学, 基礎医学系, 講師 (60231479)
• キーワード: サイトカイン / トランスジェニックマウス / 造血幹細胞 / GM- CSF / IL-3 / SCIDマウス

研究概要

IL-3とGM- CSFは共に未分化な造血前駆細胞に作用して増殖・分化を誘導するサイトカインである.他の多くのサイトカインと異なりIL-3とGM-CSFはヒトとマウスで交差反応性を示さないことが知られている.そこで今年度はヒトIL-3遺伝子とヒトGM- CSF遺伝子のcDNAをchicken albumin promoterの下流に組み込み、マウス受精卵にマイクロインジェクションすることによりそれぞれの遺伝子を発現するトランスジェニックラインを確立することを試みた.これまでにヒトGM- CSFは3ライン、ヒトIL-3は2ライン確立することができた.これらのトランスジェニックマウスでは共にヘテロの状態で平均約30ng/mlという極めて高濃度のヒトGM- CSFおよびIL-3が血清中に検出されたが、これらのマウスを詳しく解析した結果、マウスの造血系がマウスのそれぞれの受容体と全く交差反応しないことが確認された.さらにこれらのトランスジェニックマウスをSCIDマウスと交配することによりヒトサイトカイン遺伝子ををホモにもつSCIDマウスを作製した.現在両方のヒトサイトカイン遺伝子をホモに持つSCIDマウスを作製中である.このマウスができしだい純化したヒト造血前駆細胞による再構築を試みる予定である.

研究成果

• [文献書誌] Hideki Taniguchi: "Presence of hematopoietic stem cell in adult liver." Nature Medicine. 2. 198-203 (1996)
• [文献書誌] Hideki Taniguchi: "Reconstitution ratio is cretical for alloreactive T cell deletion and skin graft survival in mixed bone marrow chimeras." J. Immunol.155. 5631-5636 (1995)
• [文献書誌] Hideki Taniguchi: "Evidence for the presence of hematopoietic stem cells in the adult liver." Ttansplant. Proc.27. 196-199 (1995)
• [文献書誌] Akira Shibuya: "Lymphokine requirement for the generation of NK cells from CD34+Hematopoietic Progenitor Cells." Blood. 85. 3538-3546 (1995)
• [文献書誌] Seung Yong Park: "Developmental Defects of Lymphoid Cells in Jak3 Kinase- Deficient Mice." Immunity. 3. 771-782 (1995)
• [文献書誌] Masatake Osawa: "In vivo self- renewal of c- Kit+Sca- 1+Linlo/- hematopoietic stem cells." J. Immunol.(in press).
• [文献書誌] 松崎有末: "“造血構造・造血因子からみたモデル動物(3)Bcl- 2欠損マウスにおける造血能", 造血因子" メディカルレビュー社, 8 (1995)
• [文献書誌] 大沢匡毅: "“造血幹細胞の純化と増幅", 「Annual Review血液1995」" 中外医学社, 11 (1995)