昆中の抗菌蛋白の活性ドメインの同定と、その配列をリ-ドする新規抗菌ペプチドの作出

1997 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 07557152
• 研究機関: 東京大学
• 研究代表者: 名取 俊二 東京大学, 大学院・薬学系研究科, 教授 (50012662)
• キーワード: 抗菌ペプチド / 昆虫 / MRSA / 抗菌剤 / 感染防御 / D-エナンチオマー / α-ヘリックス / 活性ドメイン

研究概要

研究代表者はこれまでに、センチニクバエの生体防御機構に関与する様々な蛋白の精製、そのcDNAクローニングをおこなってきた。このうち、抗菌性蛋白ザ-ペシンBについて、そのα-ヘリックスに相当するアミノ酸11個よりなるペプチドに、ザ-ペシンBに匹敵する抗菌活性が認められることを示した。さらに、このペプチドを改変して得られる、より優れた抗菌活性を示すペプチドKLKLLLLLKLK-NH_2が、in vivoで感染防御効果を有することを示し、さらにこの感染防御効果が、好中球の活性化に起因する可能性を示唆した。そこで今年度は、KLKLLLLLKLK-NH_2の構造活性相関を明らかにすることを目的とした。まず、KLKLLLLLKLK-NH_2の中間部のLの数を5個から4個、3個に減少させたペプチドをそれぞれ作成し好中球の活性酸素産生量を測定したところ、Lの数を減少させたペプチドでは、まったく活性酸素は産生されず、中間部のLの数が5個であることが好中球の活性化に大変重要であることがわかった。また、N末端のKをLに、C末端のKをLに変換したペプチドをそれぞれ合成して、同様の活性を測定したところ、後者のペプチドでは顕著に活性が減少したことから特にC末端側のKが活性に重要であることが明らかとなった。これらの構造活性相関のデータを詳細に解析することで、さらなる有効な生理活性を示すペプチドの作出が可能となると考えられる。

研究成果

• [文献書誌] Yuki Nakajima: "Chemotherapeutic activity of synthetic antimicrobial peptides : correlation between chemotherapeutic activity and neutrophil-activating activity" FEBS Letters. 415. 64-66 (1997)
• [文献書誌] Shohei Hori: "Monoclonal Antibodies against Pupa-Specific Surface Antigens of Sarcophga peregrina (Flesh Fly) Hemocytes" B.B.R.C.236. 497-501 (1997)
• [文献書誌] Mariko Hijikata: "Inhibition of Protein Tyrosine Kinase by 5-S-GAD,a Novel Antibacterial Substance from an Insect" B.B.R.C.237. 423-426 (1997)
• [文献書誌] Makoto Shimoaraiso: "Identification of the Region in Yeast S-II that Defines Species Specificity in its Interaction with RNA Polymerase II" J.Biol.Chem.272(42). 26550-26554 (1997)
• [文献書誌] Takekazu Kunieda: "Regeneration of Sarcophaga Imaginal Discs in Vitro : Implication of 20-Hydroxyecdysone" Developmental Biology. 183. 86-94 (1997)
• [文献書誌] Yuki Nakajima: "A Novel Protease in the Pupal Yellow Body of Sarcophaga peregrina (Flesh Fly)" J.Biol.Chem.272(38). 23805-23810 (1997)
• [文献書誌] Shunji Natori: "Molecular Mechanisms of Immune Responses in Insects" Chapman & Hall, 325 (1998)