コレステロール代謝を転写レベルで調節する新しい抗高脂血症薬へのアプローチ

1997 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 07557161
• 研究機関: 帝京大学
• 研究代表者: 高野 達哉 帝京大学, 薬学部, 教授 (40124995)
• 研究分担者: 恵谷 誠司 帝京大学, 薬学部, 助手 (20221814) ; 森 雅博 帝京大学, 薬学部, 助手 (00230079) ; 板部 洋之 帝京大学, 薬学部, 講師 (30203079) ; 今中 常雄 帝京大学, 薬学部, 助教授 (50119559) ; 佐藤 隆一郎 大阪大学, 薬学部, 助教授 (50187259)
• キーワード: コレステロール / LDL受容体 / SREBP / 転写因子 / 動脈硬化

研究概要

本研究はLDL受容体転写因子(SREBP:SRE Binding Protein)がどのような機序でプロモーター領域(SRE:Sterol Regulatory Element)に働き、LDL受容体ならびにHMGCoA合成酵素の転写調節を行っているのか検討した。その結果、以下の知見を得た。
1)SREBPの精製タンパク質のペプチドシークエンスよりSREBP1,SREBP2の2種類の転写因子をクローニングすることができた。この2つのSREBPはいずれもbHLH-Zip構造をとり、47%のアミノ酸相同性が認められた。
2)SREBP1全長ならびにSREBP1(1-410)部分をそれぞれコードするcDNAを発現ベクターに組み込みCOS細胞に発現させ、その細胞内発現分布を蛍光抗体染色法により確認した。その結果、SREBPI全長は核膜あるいは小胞体と思われる部位に主に分布しているのに対しSREBP1(1-410)は核内にのみ観察された。この知見はSREBP1は125kDの前駆体として小胞体上で合成され、アミノ末端68kDのSREBP1(1-410)となり核内移行し転写調節活性を発現しているものと考えられる。
3)核内に移行した68kDのSREBP1(1-410)はALLNで阻害されるようなカルパイン様プロテアーゼにより分解されている可能性を示唆する知見を得た。

研究成果

• [文献書誌] Itabe,H.: "Sensitive Detection of oxidatively modified low density lipoprotein using a monoclonal antibody" J.Lipid.Res.37. 45-53 (1996)
• [文献書誌] Kawabe,Y.: "Regulation of Fatty Acid Synthase Expression by Cholesterol in Human Cultured Cells" Biochem.Biophys.Res.Commun.219. 515-520 (1996)
• [文献書誌] Sato,R.: "Sterol-dependent Transcriptional Regulation of Sterol Regulatory Element-binding Protein-2" J.Biol.Chem.271(43). 26461-26464 (1996)
• [文献書誌] Itabe,H.: "Oxidized Phosphatidylcholines That Modify Proteins" J.Biol.Chem.271(52). 33208-33217 (1996)
• [文献書誌] Ohkuma,S.: "ATP-dependent Lysis of lsolated Lysosomes by Basic Substances and Acidic lonophores" Cell Structure and Function. 22. 253-268 (1997)
• [文献書誌] Itabe,H.: "Appearance of Cross Linked Proteins in Human Atheroma and Rat Pre-Fibrotic Liver Detected by a New Monoclonal Antibody" B.B.A.Molecular Basis of Disease. (in press). (1997)
• [文献書誌] 高野達哉: "Prog.Med.16(5)(<基礎>過酸化リポタンパク質と動脈硬化の発症)" ライフサイエンス・メディカ, 4 (1996)
• [文献書誌] Itabe,H.: "Detection of Oxidized Phosphatidylcholines in Human Atherosclerotic Lesions and in Plasma LDL Fractions(Pathophysiology of Lipid Peroxides and Related Radicals)" Japan Sci.Soc.(in press), (1997)