汎用遺伝子診断システムを用いた先天性代謝異常症マススクリーニング法の確立

1995 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 07557167
• 研究種目: 試験研究(B)
• 研究機関: 東北大学
• 研究代表者: 松原 洋一 東北大学, 医学部, 助教授 (00209602)
• 研究分担者: 萩原 久 日立電子エンジニアリング, バイオ開発部門, 研究員 ; 呉 繁夫 東北大学, 医学部, 助手 (10205221)
• キーワード: 遺伝子診断 / マススクリーニング / 糖原病

研究概要

本研究は、汎用性をもち、大量の検体処理能力を有する遺伝子変異検出システムの開発を行ない、それを用いた遺伝子診断によるマススクリーニング法を確立することを目的とする。
今年度は、ミニ・シークエンス法にELISAによる呈色反応を組み合わせた手法を用い、検査検体からのDNA抽出、遺伝子増幅、変異検出反応、判定にいたる詳細な検討を行った。一方、この遺伝子変異検出システムを応用するにふさわしい遺伝子変異の同定をあわせて行った。遺伝子変異の解析を行った疾患は糖原病Ia型で、その結果、4種類の点変異を見いだした。このうち2種類はアミノ酸の置換を伴い、1種類は終止コドンを生じ、残る1変異は、塩基置換によってmRNAのスプライシング異常をひきおこすものであった。このスプライシング異常を伴う遺伝子変異は、日本人患者の70%以上に認められるcommon mutationであった。糖原病Ia型では、小児期には低血糖などの症状を示さずに経過し、成人後に腎不全や肝癌で発見される症例が相次いで報告されており、早期発見と早期治療が望まれている。これまで、糖原病Ia型の診断には、肝生検によって酵素活性を測定することが必要であった。したがって、この遺伝子変異をスクリーニングすることによって、早期発見と早期治療に役立てることは、臨床的に重要な課題であり、汎用遺伝子診断システムの対象疾患としてふさわしいと考えられる。

研究成果

• [文献書誌] 高橋和俊 ほか: "糖原病Ia型日本人症例の遺伝子変異解析" 日本小児科学会雑誌. 99. 303- (1995)
• [文献書誌] M. Aoki ほか: "Variance of Age at Onset in a Japanese Family with ALS Associated with a Novel Cu/Zn SOD Mutation" Annals of Neurology. 37. 676-679 (1995)
• [文献書誌] Y. Nagasakiほか: "Basic Research into Gene Therapy in PKU Model Mice" Gene Therapy. 2. 679- (1995)
• [文献書誌] 松原洋一 ほか: "フェニルケトン尿症の遺伝子治療" 医学のあゆみ. 175. 650-654 (1995)
• [文献書誌] 松原洋一 ほか: "遺伝病の遺伝子治療" 遺伝. 49. 19-23 (1995)
• [文献書誌] 藤原幾磨 ほか: "デオキシコルチコステロンの上昇を認めた21-水酸化酵素欠損症単純男性化型女児例" 日本小児科学会雑誌. 99. 1829-1834 (1995)
• [文献書誌] 松原洋一 ほか: "臨床DNA診断法" 金原出版, 1-1134 (1995)
• [文献書誌] 松原洋一 ほか: "遺伝子病マニュアル・上" 中山書店, 1-425 (1995)