| 研究課題/領域番号 |
07557214
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| 応募区分 | 試験 |
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| 研究機関 | 東京大学 |
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研究代表者 |
白木 和子 東京大学, 医科学研究所, 助手 (40012744)
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| 研究分担者 |
寺田 英司 北里大学, 理学部, 助教授 (10113440)
米川 博通 東京都臨床医学総合研究所, 実験動物研究部門, 室長 (30142110)
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| キーワード | トランスジェニックマウス / ポリオウイルスレセプター遺伝子 / 組織特異的発現 / 動物モデル / IRES |
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| 研究概要 |
昨年度作製した新しいトランスジェニック(Tg)マウスにおけるヒトポリオウイルスレセプター(hPVR)遺伝子の発現をノーザンブロット法およびウェスタンブロット法を使用して詳細に検討した。その結果、ヒト体内でのhPVRの分布とは異なるものの肝臓で発現していることが確認された。hPVRはヒトの肝臓では大量に発現しているが、Tg1やTg21をはじめとするこれまでのTgマウス系統の肝臓では検出できない。このように、新しいTgマウスは、少しヒト体内でのhPVR発現パターンに近付いたと思われる。肝臓でのhPVR発現を示すTgマウスは他には存在しないので、この特徴を生かした研究を展開すべく予備実験を行っている。
新しいTgマウスのトランスジーンをサザンブロット法により解析した結果、期待通り上流12kbまで組み込まれていることが判明した。したがって、マウスPVRホモログ(MPH)遺伝子の上流12kbではMPHと同様の発現パターン(ヒトでのhPVR発現パターンと似ている)は得られないことが明らかとなった。そこで、hPVRをもつYACクローンをスクリーニングし、2つのYACクローンを得た。これらのDNAの解析を行ったが、このクローンはいずれも不安定らしく、再現性のある結果は得られなかった。
ヒトとTgマウスにおける種特異的な違いにより、ポリオウイルス感染を正確に反映するTgマウスを得ることが困難である可能性がある。そこで、各種変異をもつポリオウイルスを人工的に作製し、サルとTgマウスにおける神経毒性の違いを検討した。その結果、IRES(internal rribosomal entry site)に関する宿主分子群の中に種差があることを示すデータが得られた。現在この分子の分離・同定を進めている。種差を担う分子を探し、新たなトランスジーンとする方針である。
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