1995 年度実績報告書

腎毒性予測法の開発

研究課題

研究課題/領域番号	07557317
研究種目	試験研究(B)
研究機関	杏林大学
研究代表者	遠藤仁杏林大学, 医学部, 教授 (20101115)
研究分担者	車碩鎬杏林大学, 医学部, 助手 (50276200) 関根孝司杏林大学, 医学部, 助手 (50255402) 武田理夫杏林大学, 医学部, 講師 (40255401)
キーワード	不死化細胞 / 近位尿細管中間部 / 近位尿細管終末部 / 髄質外層集合管 / シスプラチン / アポトーシス / 陰イオン有機酸輸送 / デキサメサゾン
研究概要	本年度の研究実施を計画した3項目については概ね当初の予定通りに研究を終了することができた。以下3つに分けて概要を述べる。 (1)マウス腎由来不死化培養細胞の有用性の検索。既に本研究代表者らにより樹立された温度感受性SV40T抗原の遺伝子を導入して作出したトランスジェニックマウス腎由来の細胞の中から、近位尿細管終末部(S_3)と髄質外層集合管(OMCT)の各細胞が選別された。腎毒性を示す薬物の多くが標的としているS_3細胞は、生体内に存在する場合の由来部位と極めて類似の反応性を示した。特にシスプラチン誘導アポトーシスをS_3で確認できた。反面、OMCT細胞ではアポトーシスが認められず、S_3細胞障害化学物質の陰性対照として適した細胞となる事が明らかにされた。 (2)培養細胞の特異機能発現条件の設定近位尿細管は多くの腎毒性物質の標的であるので、由来部位を明確にした培養系の確立は望まれて久しい。今回S_3細胞が本来の性質を長く維持する為の必要条件として、インスリン、上皮成長因子、トランスフェリンに加えて、デキサメサゾンの添加が必須であることを新たに見出すことができた。 (3)上皮細胞の膜極性維持条件の決定尿細管を形成する上皮系細胞の機能を充分に発揮させる為の条件は、管腔側膜と基底側膜が別個のコンパートメントに接することが必要である。特に近位尿細管の中間部(S_2)とS_3に比較的高い活性を有する陰イオン有機酸輸送機能を高い値に維持するためには小孔のある足場が必要であることをパラアミノ馬尿酸の一方向性輸送を指標に確率できることが示された。(2)で明らかにされた近位尿細管特異機能を維持させる条件と組み合わせて、生体内での機能発現に酷似した条件の確立へ発展させたい。

研究成果

(8件)

すべてその他

すべて文献書誌 (8件)

[文献書誌] S. H. Cha, K. Y. Jung H. Endou: "Effect of P_<2Y>-purinoceptor stimulation on renal gluconeogenesis in rats." Biochem. Ciophys. Res. Commun.211(2). 454-461 (1995)
[文献書誌] K. H. Lee, Y. J. Cho, S. B. Lee, K. C. Cho, S. H. Cha, H. Endou: "Evidence suggesting a role for phospholipase C isozyme, PLC-δ_1 in corticomedullary osmotic gradients in rat kidneys." Biochem. Mol. Biol. Int.37(1). 25-32 (1995)
[文献書誌] M. Takeda, M. Hosoyamada, I. Shirato, M. Obinata, H. Endou: "Establishment of vasopressin-responsive early proximal tubular cell lines derived from transgenic mice harboring temperature-sensitive simian virus 40 large T-antigen gene." Biochem. Mol. Biol. Int.37(3). 507-515 (1995)
[文献書誌] M. Takeda, K. Y. Jung. T. Sekine, H. Endou, H.: "Guanidinoacetic acid (GAA) synthesis in rat tubular suspension as a system for evaluating gentamicin (GM) nephrotoxicity." Toxicol. Let.81. 85-89 (1995)
[文献書誌] K. Nosaka, T. Takahashi, A. Miyanoshita, T. Nishi, K. Suzuki, K. Kurokawa, H. Endou: "Effect of adenosine of phorbol myristate acetate induced-reactive aoxygen metabolite production in cultured mesangial cells." Free Radical Biol. Med.20(1). 151-155 (1996)
[文献書誌] M. Hosoyamada, M. Obinata M. Suzuki, H. Endou: "Cisplatin-induced toxicity in immortalized renal cell lines established from transgenic mice harmoring temparature sensitive SV40 large T-antigen gene." Arch. Toxicol.70. 284-292 (1996)
[文献書誌] H. Endou, M. Hosoyamada: "Diuretics (Greger, R. F. et al. eds.)" Springer-Verlag, 517 (1996)
[文献書誌] 長沢俊彦、河邉香月伊藤克己、浅野泰、遠藤仁: "Annual Review 腎臓" 中外医学社, 295 (1996)

1995 年度 実績報告書

腎毒性予測法の開発

研究代表者

遠藤 仁 杏林大学, 医学部, 教授 (20101115)

研究成果

[文献書誌] S. H. Cha, K. Y. Jung H. Endou: "Effect of P_<2Y>-purinoceptor stimulation on renal gluconeogenesis in rats." Biochem. Ciophys. Res. Commun.211(2). 454-461 (1995)

[文献書誌] K. H. Lee, Y. J. Cho, S. B. Lee, K. C. Cho, S. H. Cha, H. Endou: "Evidence suggesting a role for phospholipase C isozyme, PLC-δ_1 in corticomedullary osmotic gradients in rat kidneys." Biochem. Mol. Biol. Int.37(1). 25-32 (1995)

[文献書誌] M. Takeda, M. Hosoyamada, I. Shirato, M. Obinata, H. Endou: "Establishment of vasopressin-responsive early proximal tubular cell lines derived from transgenic mice harboring temperature-sensitive simian virus 40 large T-antigen gene." Biochem. Mol. Biol. Int.37(3). 507-515 (1995)

[文献書誌] M. Takeda, K. Y. Jung. T. Sekine, H. Endou, H.: "Guanidinoacetic acid (GAA) synthesis in rat tubular suspension as a system for evaluating gentamicin (GM) nephrotoxicity." Toxicol. Let.81. 85-89 (1995)

[文献書誌] K. Nosaka, T. Takahashi, A. Miyanoshita, T. Nishi, K. Suzuki, K. Kurokawa, H. Endou: "Effect of adenosine of phorbol myristate acetate induced-reactive aoxygen metabolite production in cultured mesangial cells." Free Radical Biol. Med.20(1). 151-155 (1996)

[文献書誌] M. Hosoyamada, M. Obinata M. Suzuki, H. Endou: "Cisplatin-induced toxicity in immortalized renal cell lines established from transgenic mice harmoring temparature sensitive SV40 large T-antigen gene." Arch. Toxicol.70. 284-292 (1996)

[文献書誌] H. Endou, M. Hosoyamada: "Diuretics (Greger, R. F. et al. eds.)" Springer-Verlag, 517 (1996)

[文献書誌] 長沢俊彦、河邉香月 伊藤克己、浅野 泰、遠藤 仁: "Annual Review 腎臓" 中外医学社, 295 (1996)

1995 年度実績報告書

遠藤仁杏林大学, 医学部, 教授 (20101115)

[文献書誌] 長沢俊彦、河邉香月伊藤克己、浅野泰、遠藤仁: "Annual Review 腎臓" 中外医学社, 295 (1996)