人工歯根における歯根膜の構築

1997 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 07557368
• 研究機関: 東北大学
• 研究代表者: 奥田 禮一 東北大学, 歯学部, 教授 (80005024)
• 研究分担者: 岩松 洋子 東北大学, 歯学部・付属病院, 助手 (50261524) ; 清水 義信 東北大学, 歯学部, 助教授 (20005078) ; 茂木 克俊 東北大学, 歯学部, 教授 (60013984) ; 渡辺 誠 東北大学, 歯学部, 教授 (80091768) ; 加賀山 学 東北大学, 歯学部, 教授 (60004610)
• キーワード: チタン / 歯根膜細胞 / 立体培養 / 人工歯根 / 歯根膜細胞構築 / マラッセの上皮遺残

研究概要

1.チタンの表面におけるヒト歯根膜由来細胞の増殖、分化機能について検討した結果、平滑面およびガラスビーズサントブラスト処理面において細胞の密着性は優れていた。
2.ヒト歯根膜由来繊維芽細胞をoutgrowth法にて培養し、クローン化して検討したところ、増殖能や分化機能(アルカリフォスファターゼ)において各種の特性を有する数種の異なった細胞集団が得られた。
3.outgrowth法と無血清培養法を応用することによって、サイトケラチン抗体陽性のヒト歯根膜由来上皮細胞の分離培養(5代まで)が可能になり、これらの細胞の増殖および分化機能に関する知見を得た。
4.マイクロキャリアーを用いて、ヒト歯根膜から分離した細胞の大量培養技術を確立し、さらにこの培養法によって得られた細胞の生化学的機能について現在検討中である。
5.歯根膜発生過程において、主線維形成直前にある間葉系細胞群に高いアルカリフォスファターゼ活性ならびにICAM-1が発現していた。また、咬合機能開始後に歯根膜線維芽細胞に酸性フォスファターゼ(ACPase)活性および成熟マクロファージ抗体F4/80の発現が上昇し、抗マクロファージ抗体MOMA-2の発現は減少した。
6.咬頭削合により咬合圧を変化させた場合、ACPase活性およびMOMA-2の発現は咬頭削合初期に有意に上昇し、F4/80の発現はその後の線維再生期に上昇した。このことから、歯根膜組織変化と抗マクロファージ抗体陽性反応との関連性が示唆された。
7.in vivoにおける歯根膜中の上皮細胞(マラッセの上皮遺残)に関する形態および分布の局在、セメント質形成量、セメント芽細胞と思われるオステオカルシン陽性細胞の分布局在について免疫組織化学染色により検討したところ、上皮細胞がセメント質形成に関与していることが示唆された。これら上皮細胞にBrdUの取り込みはみられなかったが、アポトーシス抑制蛋白であるbcl-2蛋白の発現がみられた。
8.歯根膜の生理的機能を検討したところ、遅順応性ニューロンと速順応性ニューロンで感覚情報の受容に差がみられた。

研究成果

• [文献書誌] Iwamatsu Y.et al.: "On the developing Periodontal ligament of rats,using a new specimen preparation method for SEM in comparison with histochemistry" Acta Anatomica Nipponica. 70(4). 322-329 (1995)
• [文献書誌] Tsuboi A.et al.: "Rubber hardness discrimination and associated bite force in implant patients" J.Dent Res. 74. 494 (1995)
• [文献書誌] 許 重人ら: "インプラント患者のゴム硬さ弁別と咬合力" 補綴誌. 39(93s). 135 (1995)
• [文献書誌] Kagayama M.et al.: "Time and position-specific expression of glycosaminoglycans in rat moolar cementum related to physiological tooth movement" J.Periodont Res. 30. 285-289 (1995)
• [文献書誌] 金田一孝二ら: "中間セメント質にみられる細胞とアポトーシスの関係" 日本解剖学会誌. 70(s). 127 (1995)
• [文献書誌] Shimizu Y.et al: "Suppression of osteoclast-like cell formation by periodontal ligament cells" J.Bone Miner Metab. 14(2). 65-72 (1996)
• [文献書誌] Kagayama M.et al.: "Localization of glycosaminoglycans in periodontal ligament during physiological and experimental tooth movement" J.Periodont Res.31. 229-234 (1996)
• [文献書誌] Kagayama M.et al.: "An improved mounting method for observation of thick specimens using confocal microscopy" Biotechnic and Histochemistry. 71(5). 231-233 (1996)
• [文献書誌] 下西 充ら: "培養ヒト歯根膜由来上皮細胞の免疫組織化学的特性" 日本歯科保存学雑誌. 39(s). 36 (1996)
• [文献書誌] 加賀山 学ら: "ラット臼歯におけるセメント質形成" 歯科基礎医学会雑誌. 38(s). 114 (1996)
• [文献書誌] 清水 義信ら: "ヒト末梢血リンパ球・単球の培養中にみられるTRAP陽性多核巨細胞について" 歯科基礎医学会雑誌. 38(s). 447 (1996)
• [文献書誌] Kagayama M.et al.: "Confocal microscopy of cementocytes and their lacunae and canaliculi in rat molars." Anat Embryol. 195. 491-496 (1997)
• [文献書誌] Kagayama M.et al.: "Expression of osteocalcin in cementoblasts forming acellular cementum" J.Periodont Res.32. 273-278 (1997)
• [文献書誌] 清水 義信ら: "In vitro培養したヒト末梢血リンパ球/単球から形成された破骨細胞様細胞と骨吸収窩" Jpn J.Oral Biol.39(1). 55-63 (1997)
• [文献書誌] Shimizu Y.et al.: "Resorbable bioactive glass and resorbable hydroxyapatite in bone remodeling" Implant Dentistry. 6(3). 269-274 (1997)
• [文献書誌] 清水 義信ら: "骨改造に対する生体活性ガラス、ハイドロキシアパタイトおよび脱灰凍結乾燥人骨粉の作用" 生体材料. 15(3). 5-14 (1997)
• [文献書誌] 平田 政嗣ら: "ラット臼歯歯根膜における上皮遺残の分布-酵素・免疫組織化学的研究-" 日本歯科保存学雑誌. 40(s). 60 (1997)
• [文献書誌] 金田一 孝二ら: "歯根膜の発生過程におけるマクロファージ系細胞の分布変化" 歯科基礎医学会雑誌. 39(s). 103 (1997)
• [文献書誌] 下西 充: "培養ヒト歯根膜由来上皮細胞の免疫組織化学的特性" 日本歯科保存学雑誌. 40(4). 985-993 (1997)
• [文献書誌] 岩松 洋子ら: "歯冠削除時のマウス臼歯歯根膜における抗マクロファージ抗体の出現" 歯科基礎医学会雑誌. 39(s). 104 (1997)
• [文献書誌] 平田 政嗣ら: "マラッセの上皮遺残におけるBrdU取り込みおよびbcl-2蛋白の発現" 歯科基礎医学会雑誌. 39(s). 104 (1997)
• [文献書誌] 西浦 寛人: "咀嚼機構における歯根膜感覚情報の役割に関する研究" JADR. (1997)