| 研究課題/領域番号 |
07557374
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| 応募区分 | 試験 |
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| 研究機関 | 昭和大学 |
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研究代表者 |
野瀬 清 昭和大学, 薬学部, 教授 (70012747)
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| 研究分担者 |
松村 外志張 明治乳業, ヘルスサイエンス研究所, 副所長
山元 俊憲 昭和大学, 薬学部, 助教授 (30112741)
真下 順一 昭和大学, 薬学部, 助手 (60054045)
江川 清 昭和大学, 薬学部, 講師 (00095879)
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| キーワード | WAF1遺伝子 / 薬物スクリーニング / p53蛋白質 |
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| 研究概要 |
本研究は、細胞周期の調節に重要な役割をもつサイクリン阻害因子の遺伝子転写エンハンサーを用い、その活性を変化させる生物活性物質のスクリーニング法を確立することを目的としている。まず、p21(WAF-1)遺伝子の発現を指標とし、p53蛋白質の機能、特に変異型の機能回復を起こす薬物の検索法を確立するため、WAF-1遺伝子エンハンサーをレポーターとしてのルシフェラーゼ遺伝子に連結した組み換え体を作成した。これをp53を欠損した細胞(ヒト骨肉腫Saos-2)または変異型p53を発現する細胞(ヒト胃癌TMK-1)に導入して、これらの遺伝子を安定に保持している細胞クローンを樹立した。さらに、p21エンハンサーをいくつかの制限酵素断片に分け、それぞれをレポーターに連結して細胞に導入してレポーターの発現を測定することにより、正常p53およびp53非依存的に活性化する薬物の探索法を確立した。次にこれらの細胞株を用いて、放線菌培養上清をスクリーニングした結果、これまでに300種類の検体から1種の有望な活性が認められた。現在、この活性物質の分離同定を進めている。また、既知の制癌剤の中で、トポイソメラーゼIIを阻害するエリプチシンの誘導体が、変異型p53の生物活性を回復させる可能性が示され、非常に興味深い。
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